乳酸是生物体代谢过程中重要的中间产物,与糖代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及细胞内能量代谢密切相关,乳酸含量是评估糖元代谢的和有氧代谢的重要指标。乳酸实际上存在两种光学异构体:D-乳酸和L-乳酸。L-乳酸在人类和哺乳动物中含量更丰富,其在血液中的浓度是D-乳酸的100倍。D-乳酸主要由某些细菌(如乳酸杆菌、大肠杆菌)发酵产生。人体对 D-乳酸的代谢能力有限,正常情况下,人体内的 D-乳酸含量甚微,D-乳酸在体内积累可引发D-乳酸酸中毒,表现为神经功能障碍和脑病。本试剂盒提供了一种检测生物样品中D-乳酸的便捷方法。在该试剂盒中,D-乳酸盐在D-乳酸脱氢酶的作用下生成丙酮酸,同时使NAD+还原生成NADH,可与四唑盐WST-8染料反应,形成与样本中的D-乳酸盐浓度成正比例的有色产物,其在450nm处有大吸收峰,据此可计算D-乳酸含量。由于D-乳酸脱氢酶的特异性,L-乳酸不会造成干扰。
酶标仪或可见光分光光度计(能测450nm处的吸光度)
恒温箱、制冰机、低温离心机
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
去离子水
10kDa MW 超滤管、匀浆器(如果是组织样本)
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答:可能的原因包括培养基质量、血清质量、温度、pH值、气体比例等。
解决方法有:
1. 使用高质量的培养基和血清,确保其无菌、无支原体污染,并保证在保质期内使用;
2. 培养箱温度和气体比例要保持稳定,定期校准;
3. 每天检查并记录细胞培养的环境参数,如温度、pH值、气体比例等,以便及时发现问题;
4. 定期更换培养基,保持细胞营养充足;
5. 对于生长缓慢的细胞株,可以尝试进行克隆筛选或更换培养基。
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