彩色预染蛋白 Marker plus(8-180kDa)包含了从 8kDa 到 180kDa 共 10 种高度纯化并预染的重组蛋白质(8, 16.5, 25, 31, 41, 52, 72, 95, 130,180kDa),其中 72kDa 条带为橙红色,8kDa 为绿色,其余条带为蓝色。本产品预染蛋白表观 分子量经过 thermo26610 和 26614 非预染蛋白质分子量标准标定,适合作为 SDS-PAGE 和 Western 的蛋白质分 子量标准,可用于监测电泳过程中蛋白分离效果,检验 Western 转膜(PVDF,尼龙膜或 NC 膜)效果,判断蛋白 的分子量大小。 本彩色预染蛋白 Marker 已经配制在 1x SDS-PAGE 上样缓冲液中,可直接上样使用,不需要煮沸、稀释和加入还原剂处理。
20mMTris-H3PO4(pH7.5), 2mM EDTA, 1.5% (W/V) SDS,15 % (V/V) Glycerol, 3mM DTT,0.1% (V/V) Proclin300,4M Urea。
(1) 室温下解冻后完全溶解并轻轻充分混匀后使用,不要煮沸; (2) 取本产品 5ul 与实验样品同时进行聚丙烯酰胺凝胶电泳;建议有条件的实验室在初次使用本产品时可以根 据自身的实验条件和实验习惯通过预实验确定合适的上样量,这样可以节约成本,同时获得效果更佳的实验 图片; (3) 根据上样孔的大小,本产品通常每次上样 5-10ul(5x1.5mm 胶孔 5ul 足够),即可在电泳时、电泳后和转膜后 观察到非常清楚的蛋白条带; (4) 未使用的彩色预染蛋白 Marker 保存于储存条件,在 4℃可放置 2 个月。
(1) 为避免反复冻融及污染,可将本产品分装后,-20℃保存。 (2) 电泳时间不宜过长,长时间可能导致蛋白条带出现弥散现象。 (3) 在低浓度胶时,低分子量蛋白会泳动于染料前缘。 (4) 大分子量蛋白 Western blot 时需要延长转膜时间或加高转膜电压,如果效果不好建议减少转膜液甲醇用 量,添加少量 SDS(终浓度不超过 0.05%)。 (5) 预染蛋白质在不同的缓冲体系下有不同的表观分子量,可在该缓冲体系中事先用非预染蛋白质分子量标准 校正,并按校正后的结果正常使用。 (6) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 (7) 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
更新中
1、可选择孔径0.22um的PVDF膜或者NC膜,转膜时间缩短,另外可采用Tricine-SDS-PAGE体系;
2、也可以选择PSQ 膜,同时缩短转移时间。也可以将两张膜叠在一起,再转移。其他按步骤即可。
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