彩色预染蛋白 Marker(25-400kDa)
货号:PMK0629
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价格:
120.00
规格:
20ul
100ul
5*100ul
货期:
现货
未使用的彩色预染蛋白Marker保存于储存条件,在 4℃可放置 2 个月
Details
产品详情
  • 产品简介

    彩色预染蛋白 Marker(25- 400kDa)包含了从25kDa到400kDa共10种高度纯化并预染的重组蛋白质(25,45,72,100,130,  160,200,250,300,400kDa) ,其中400kDa为红色,72kDa条带为橙红色,25kDa为绿色,其余条带为蓝色。本产品预染蛋白表观分子量经过Bio-Rad 1610363、 thermo26610和 26614非预染蛋白质分子量标准标定,适合作为SDS-PAGE和Western的蛋白质分子量标准,可用于监测电泳过程中蛋白分离效果,检验Western转膜(PVDF 、尼龙膜或 NC膜)效果,判断蛋白的分子量大小。

    本彩色预染蛋白 Marker已经配制在1x SDS-PAGE上样缓冲液中,可直接上样使用,不需要煮沸、稀释和加入还原剂处理。根据上样孔大小,本彩色预染蛋白质分子量标准通常每次上样10ul(5×1.5mm胶孔10ul足够),即可在电泳时、电泳后和转膜后观察到非常清楚的蛋白条带。

  • 缓冲液成分

    62.5mM Tris-H3PO4(pH7.5) ,2mM EDTA ,2% (W/V)SDS ,33% (W/V)Glycerol ,5mM DTT, 0.02% (V/V) proclin300。

  • 使用方法

    (1) 室温下解冻后完全溶解并轻轻充分混匀后使用,不要煮沸;

    (2) 取本产品10ul与实验样品同时进行聚丙烯酰胺凝胶电泳;建议有条件的实验室在初次使用本产品时可以根据自身的实验条件和实验习惯通过预实验确定合适的上样量,这样可以节约成本,同时获得效果更佳的实验图片;

    (3) 未使用的彩色预染蛋白Marker保存于储存条件,在 4℃可放置 2 个月。

  • 注意事项

    (1) 为避免反复冻融及污染,可将本产品分装后,-20℃保存。

    (2) 电泳时间不宜过长,长时间可能导致蛋白条带出现弥散现象。

    (3) 在低浓度胶时,低分子量蛋白会泳动于染料前缘。

    (4) 大分子量蛋白 Western blot时需要延长转膜时间或加高转膜电压,另外建议转膜液不添加SDS,若实验必须使用,建议SDS浓度不要超过 0.02-0.04%。

    (5) 预染蛋白质在不同的缓冲体系下有不同的表观分子量,可在该缓冲体系中事先用非预染蛋白质分子量标准校正,并按校正后的结果正常使用。

    (6) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    (7) 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

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Product Q&A FAQ
产品问答FAQ
  • Western Blot(WB)实验中有很多杂带咋回事?

    答:可能的原因有:

    1、目的蛋白有多个修饰位点,本身可以呈现多条带,建议查阅文献或进行生物信息学分析,获得蛋白序列的修饰位点信息,通过去修饰确定蛋白实际大小;

    2、样本处理过程中目的蛋白发生降解,建议加入蛋白酶抑制剂;样本处理时在冰上操作;

    3、杂蛋白多,建议处理目的蛋白;

    4、抗体特异性不强,建议使用特异性强的抗体;

    5、抗体孵育时间过久,建议减少抗体孵育时间;

    6、二抗与抗原有交叉反应,建议选择合适的封闭物;

    7、二聚体或多聚体存在,建议增加蛋白质变性过程及强度;

    8、底物显色与曝光时间过长,建议缩短显色及曝光的时间。


  • Western Blot(WB)实验中蛋白条带位置(大小)不对咋整?

    答:可能的原因有:

    1、胶浓度不对,不同浓度的胶跑出的蛋白条带的位置可能有所偏差,可以调整浓度;

    2、抗体孵育不充分,建议增加抗体浓度,延长孵育时间;

    3、酶失活,建议直接将酶和底物进行混合,如果不显色则说明酶失活了。选择在有效期内、有活性的酶联物;

    4、目的蛋白存在翻译后修饰或剪切体,建议查询相关文献确定;

    5、标本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低,建议设置阳性对照比对结果,增加标本上样量。


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