磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffered Saline,简称 PBS)是常用的用于生物学研究的一个缓冲溶液。PBS缓冲液有助于保持恒定的pH值,其渗透压和离子浓度通常与人体pH相近(等渗),本产品pH为7.2-7.4,溶解后浓度0.01M。本产品主要成分为氯化钠 137 mM 磷酸氢二钠 10 mM 磷酸二氢钾 1.76mM 氯化钾 2.7 mM。每袋PBS干粉彻底溶解于2000mL双蒸水中即可使用。
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答:可能的原因有:
1、胶浓度不对,不同浓度的胶跑出的蛋白条带的位置可能有所偏差,可以调整浓度;
2、抗体孵育不充分,建议增加抗体浓度,延长孵育时间;
3、酶失活,建议直接将酶和底物进行混合,如果不显色则说明酶失活了。选择在有效期内、有活性的酶联物;
4、目的蛋白存在翻译后修饰或剪切体,建议查询相关文献确定;
5、标本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低,建议设置阳性对照比对结果,增加标本上样量。
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