改良Mayer苏木素染色液(免疫组化)
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150.00
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100ml
500ml
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产品详情
  • 产品简介

    苏木素(Hematoylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色,是病理学和组织学常用的一种染色方法,苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色;细胞核内染色质的主要成分是 DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。

    改良Mayer苏木素染色液无毒,无氧化膜,细胞核染色质着色深而细微,临床上常替代Harris苏木素染色液;对细胞核染色很清晰,不着染胞质和纤维成分,属进行性染色故染色后可以不用盐酸乙醇分化染色时间约5-8min ,如果是充分氧化后可染色3-5min。该试剂常用于糖原等特染、酶组化和免疫组化等染色后复染细胞核作对照染色,尤其适用于经过特殊染色后不能经酸处理时对细胞核的复染,在特殊染色中常与天青石蓝B液联合染色,使细胞核染色后不被后续的酸性染料所褪色。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。

  • 使用步骤

    (一)石蜡切片染色

    1、切片脱蜡至水

    ①二甲苯或浸蜡脱蜡透明液作用2次,每次5 ~ 10min。 

    ②(可选)无水乙醇作用2次,每次3~ 5min.

    ③95%乙醇3 ~ 5min

    ④90%乙醇3 ~ 5min

    ⑤80%乙醇3 ~ 5min

    ⑥自来水或蒸馏水(亦可用30~ 40°C温水)冲洗1 ~ 3min

    2、染色

    ①改良Mayer苏木素染色液5~ 8min

    ②自来水或蒸馏水冲洗5~ 10s

    ③(可选)盐酸乙醇分化2~ 5s

    ④自来水冲洗20~ 30s

    ⑤蓝化液或温水返蓝20~ 40s

    ⑥80%乙醇脱水30 ~ 60s

    ⑦伊红染色液(醇溶)染色30s ~ 3min

    3、脱水、透明、封固

    ①80%乙醇10 ~ 20s

    ②90%乙醇10~ 20s

    ③95%乙醇作用2次,每次1 ~ 2min。

    ④无水乙醇作用2次,每次2~ 3min。

    ⑤二甲苯或浸蜡脱蜡透明液透明3次,每次2 ~ 3min。

    ⑥中性树胶封片。

    (二)冰冻切片染色

    1、乙醚-乙醇混合固定液5~ 10s

    2、自来水冲洗2~ 5s

    3、苏木素染色液滴染1 ~ 2min(可加热至50°C)。

    4、自来水冲洗2~ 5s

    5、(可选)盐酸乙醇分化2~ 5s

    6、自来水冲洗2~5s

    7、蓝化液或温水返蓝2~ 5s

    8、80%乙醇脱水5~ 10s

    9、伊红染色液(醇溶)染色2~ 5s

    10、80%乙醇1~ 2s

    11、95%乙醇1~ 2s

    12、无水乙醇2~ 5s

    13、苯酚二甲苯(1:3)2~ 5s

    14、二甲苯或浸蜡脱蜡透明液透明3次,每次2~ 5s。15、中性树胶封片。

    (三)细胞染色

    1、4%多聚甲醛固定10 ~ 20min.

    2、自来水冲洗2次,每次2min。

    3、蒸馏水冲洗2次,每次2min。

    4、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤,作用时间应相应缩短。

  • 注意事项

    1.切片脱蜡应尽量干净。

    2.系列乙醇应经常更换新液。

    3.盐酸乙醇分化时间应根据切片厚薄、组织类别以及新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够,以便彻底清洗酸。

    4.乙醚-乙醇混合固定液是由乙醚和95%乙醇等量混合而得, 再加入适量乙酸,密闭保存。

    5.冷冻切片染色时间尽量要短。

    6.蓝化液常使用0.2-1%氨水或Scott促蓝液或0.1-1%碳酸锂溶液。

    7.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴-次性手套操作。

    8.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

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Product Q&A FAQ
产品问答FAQ
  • Western Blot(WB)实验中有很多杂带咋回事?

    答:可能的原因有:

    1、目的蛋白有多个修饰位点,本身可以呈现多条带,建议查阅文献或进行生物信息学分析,获得蛋白序列的修饰位点信息,通过去修饰确定蛋白实际大小;

    2、样本处理过程中目的蛋白发生降解,建议加入蛋白酶抑制剂;样本处理时在冰上操作;

    3、杂蛋白多,建议处理目的蛋白;

    4、抗体特异性不强,建议使用特异性强的抗体;

    5、抗体孵育时间过久,建议减少抗体孵育时间;

    6、二抗与抗原有交叉反应,建议选择合适的封闭物;

    7、二聚体或多聚体存在,建议增加蛋白质变性过程及强度;

    8、底物显色与曝光时间过长,建议缩短显色及曝光的时间。


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