在组织切片过程中，一些组织内含有骨质或钙化灶时，含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。这是因为钙和石蜡之间的密度不同，较难切出完整的切片。对含钙组织好固定之后，再进行脱钙或二者同时进行。然后进行下游操作如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。用于脱钙的试剂很多，脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙。EDTA是一种相对较好的螯合脱钙剂，对组织结构影响小，可以较好的保存组织的某些酶类，经EDTA 脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。但是该法脱钙速度太慢，一般脱需要数周至数月。JYBL -Ⅰ脱钙液主要由稀酸、甲醛、甲酸等组成。

其优点是：①作用迅速，24～36h即可；②对组织的结构损害小；③脱钙完全。该脱钙液特别适用于日常病理科骨组织标本的脱钙，但不宜用化学方法确定脱钙终点。

1. 骨组织脱钙时，取材不易过厚，一般大约5mm。

2. 组织固定后，用PBS清洗3次，每次20min。

3. 组织用蒸馏水洗清洗3次，每次20min。

4. 组织转移至20~30倍体积的JYBL-Ⅰ脱钙液中，脱钙24～36h。如果想加快脱钙速度，可以置于37℃进行脱钙。

5. 用蒸馏水冲洗数次。

6. 常规脱水、包埋。

1. 厚度5mm的骨组织块脱钙时间一般脱钙24～36h即可。

2. 适当加温能加快脱钙的速度，一般不应超过37～40℃，温度过高容易使骨组织造成松散解体，尤其不可大于60℃。

3. 脱钙应彻底，防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间，以免脱钙过长引起组织损害。

4. 脱钙用具避免使用金属容器，尽量使用玻璃容器。

5. 骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行，不应先脱钙后固定，以便减少组织的损伤程度。

6. 每隔一段时间检测一次脱钙程度，脱钙过度会增加组织的损伤程度，影响染色结果。

7. 脱钙终点的测定(物理法)：采用针刺、手掐、钳夹等方法，当骨组织变软或针刺时没有阻力感即可终止脱钙。物理检测法会对组织结构有一定的损害，尽量避免用力过大或反复检测。

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