脂质(Lipid)是中性脂肪、类脂及其衍生物的总称，其共同的物理特性是不溶于水，易溶于有机溶剂(如乙醇、乙醚等)。人体的脂肪主要有两种：1、储存脂肪，如中性脂肪，主要分布于皮下、肾、胰腺等部位。2、结构脂肪，如类脂(磷脂、糖脂、胆固醇等)，主要分布于细胞内。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油组成的脂类，呈中性。中性脂肪是储存能量的方式之一，在氧化时释放出能量。中性脂肪染色经常采用苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、苏丹黑B、油红O法等。传统方法采用苏丹染料，近发现偶氮染料油红O更适合脂肪的染色。油红O是很强的脂溶剂和染脂剂，较易与甘油三脂结合呈小脂滴状，与磷脂结合力稍差，其染色原理一般认为是物理上的溶液作用或吸附作用，借溶液作用使脂肪染色。染料在细胞内脂质的溶解度较原溶剂中的溶解度更大，所以在染色时染料就从有机溶剂转移入脂质而使脂肪染色。

油红O染色液(细胞专用)简称ORO染色液，可显示小的脂滴，可优先为脂类从溶剂中吸附染料。标本不采用含有乙醇的固定液，如需要固定可采用10%福尔马林)。脂肪阳性染色结果呈橘黄至红色，但具体颜色因脂质浓度而定。

1、 冰冻切片厚度 6～10um，不固定或10%福尔马林固定10min后水洗，蒸馏水稍冲洗。

2、 入油红O染色洗涤液清洗20～30s。

3、 入改良油红O染色液(加盖)，密闭染色10～15min。

4、 入油红O染色洗涤液漂洗20～30s以便去除染液，蒸馏水稍微清洗。

5、 入 苏木素染色液，复染核2～5min，自来水漂洗10min至核为蓝色。(选做)

6、 蒸馏水稍微清洗，滤纸吸干周围水分。

7、 水溶性封固剂(甘油明胶或阿拉伯糖胶)封固，镜检。

1、 由于脂肪易溶于有机溶剂，组织不能采用含有机溶剂的固定液(如需要固定可采用10%福尔马林)，亦不采用石蜡切片，需用冰冻切片或碳蜡切片。

2、 作脂肪染色的冰冻切片不可太薄，过薄的切片常会使脂质丢失。

3、 改良油红O染色液易产生沉淀，影响染色观察，可采用静置20～40min或3000rpm 离心10分钟取上清备用。

4、 苏木素染色液复染时间不能过长。

5、 染色结果不能长期保存，应尽快观察及照相。

6、 水溶性封固剂封固的样本保存时间不长；如需长期保存，可以在盖玻片与载玻片交界的边缘用中性树胶封闭。

7、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。