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可能的原因有:
1.抗体交叉——使用经过验证的高特异性抗体;
2.样本中存在内源性荧光——使用荧光染料的不同激发和发射波长,避免内源性荧光的干扰
3.封闭不充分——优化封闭步骤,使用合适的封闭剂
可能原因的有:
1.抗体非特异性结合——使用特异性更高的抗体;
2.封闭不充分——优化封闭步骤,使用合适的封闭剂(如BSA或血清);
3.抗体浓度过高——调整抗体浓度;
4.洗涤不充分——增加洗涤次数和时间,确保彻底去除未结合的抗体。
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