
与原始的随机交配3T3和近交系BALB/c3T3建株方法一样,NIH/3T3,是从NIH Swiss小鼠胚胎培养物中建立的高度接触抑制的连续细胞株。为了培育在形态学特征上更适合于进行转化分析的亚株,建立的NIH/3T3细胞株又进行了五轮以上亚克隆。这株细胞对DNA转化及转染研究十分有用。检测表明肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。

1.来源:小鼠胚胎
2.形态:成纤维细胞,贴壁生长
3.含量:>1x10^6 细胞数
4.规格:T25 瓶或者1mL冻存管包装
5.用途:仅供科研使用。

干冰运输及复苏好存活细胞
1.1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2.T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

1.收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2.请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10X,20x)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3. 贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4.备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1:2传代。

1.准备DMEM基础培养基86%、小牛血清10%、P/S青霉素-链霉素1%、MEM NEAA非必需氨基酸1%、Sodium Pyruvate丙酮酸钠1%、GlutaMAX-1谷氨酰胺1%。
2.培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。2-3天换液一次。
3.冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
更新中...
答:可能的原因包括培养基质量、血清质量、温度、pH值、气体比例等。
解决方法有:
1. 使用高质量的培养基和血清,确保其无菌、无支原体污染,并保证在保质期内使用;
2. 培养箱温度和气体比例要保持稳定,定期校准;
3. 每天检查并记录细胞培养的环境参数,如温度、pH值、气体比例等,以便及时发现问题;
4. 定期更换培养基,保持细胞营养充足;
5. 对于生长缓慢的细胞株,可以尝试进行克隆筛选或更换培养基。
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