细胞增殖的检测对于评估细胞健康,确定遗传毒性或评估抗癌药物至关重要。目前直接测量 DNA 合成是准确的方法,在复制过程中将核苷类似物(例如[3H]胸苷或 5-溴-2'-脱氧尿苷)加入到细胞中,然后通过放射自显影或使用 BrdU 抗体来进行检测。EdU-488法细胞增殖成像分析试剂盒是一种替代 BrdU 的新型检测方法。EdU(5-乙炔基-2′-脱氧尿苷)是胸腺嘧啶核苷的核苷类似物,可以在 DNA 合成过程中替代胸苷掺入到新合成的 DNA 中。与 BrdU 方法相比 EdU-Click 检测不是基于抗体,因此不需要通过DNA 变性(变性通常使用氯化氢、加热或脱氧核糖核酸酶消化)来检测加入的核苷。检测基于 Click 反应,叠氮化物和炔烃之间由铜催化的共价反应,整个反应 30min 内可完成。
低温离心机
可调节式移液枪及枪头
去离子水
固定液(含 3.7%甲醛的 PBS)
通透剂(含 0.5%Triton X-100 的 PBS)
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答:可能是由于培养条件不适、基因突变、药物作用等原因引起的。
解决方法:
1、优化培养条件,如调整温度、pH值、气体比例等;
2、观察细胞形态和生长情况,及时发现凋亡迹象;
3、对于凋亡严重的细胞株,可以尝试进行基因检测和药物筛选,以找到引起凋亡的原因。
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