研究细胞运动和定位,需要用到对活细胞无毒的专一性探针。活细胞示踪试剂盒提供了一种通用且保存良好的细胞示踪试剂(活细胞荧光示踪探针),用于监测细胞的移动,位置,增殖,迁移,趋化性和侵袭性。活细胞荧光示踪探针,可以通过被动扩散进入细胞,与细胞内蛋白共价结合,是一种长效细胞示踪染料。一旦进入细胞,非荧光性的活细胞荧光示踪探针会被胞内酯酶水解,产生绿色荧光(Ex/Em=494/521nm)。这些荧光产物只能积聚在具有完整细胞膜的细胞中,因此死细胞因无完整细胞膜不能被染色。活细胞荧光示踪探针对pH变化不敏感,可以由甲醛或戊二醛固定。活细胞荧光示踪探针可以在活细胞中保留好几代,并可以显示荧光至少一周。探针可被转移到子细胞,但是不转移到群体中的相邻细胞。
荧光显微镜或流式细胞仪、离心机
24孔板、可调节式移液枪及枪头
去离子水、PBS
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答:可能的原因包括培养基质量、血清质量、温度、pH值、气体比例等。
解决方法有:
1. 使用高质量的培养基和血清,确保其无菌、无支原体污染,并保证在保质期内使用;
2. 培养箱温度和气体比例要保持稳定,定期校准;
3. 每天检查并记录细胞培养的环境参数,如温度、pH值、气体比例等,以便及时发现问题;
4. 定期更换培养基,保持细胞营养充足;
5. 对于生长缓慢的细胞株,可以尝试进行克隆筛选或更换培养基。
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