Hot Start Taq DNA Polymerase
货号:PMK0837MU
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价格:
80.00
规格:
100ul
500ul
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产品详情
  • 产品简介

    Hot Start Taq DNA Polymerase是重组Taq DNA Polymerase经化学修饰后得到的热启动Taq酶。在常温或低温下该酶没有活性,经95℃孵育5min后酶活性完全释放。具有5’-3’DNA聚合酶活性和5’-3’外切核酸酶活性,无3’-5’外切酶活性,延伸速度为1kb/分钟,产物3’端带A,可直接用于TA载体克隆。PCR中使用热启动Taq酶可以有效保证产物的特异性,大限度抑制非特异扩增,适用于从复杂模板中扩增PCR产物以及多重PCR/qPCR反应。 

    1单位(U) Taq DNA Polymerase活力定义为在74℃、30min内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,将10nmol 脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。本产品的浓度为5U/ul。


  • 操作步骤

    1. PCR 反应液组成(50μL)

    试剂

    体积

    Hot Start Taq DNA Polymerase(5U/μl)

    0.5ul

    10×Taq Buffer(Mg2+free)

    5ul

    25mM MgCl2

    X ul*

    dNTP(10mM each)

    1ul

    正向引物(10μM)

    1~2ul**

    反向引物(10μM)

    1~2ul**

    模板DNA

    500ng***

    DNase-Free Water

    Up to 5l

    *推荐Mg2+终浓度为1.5~2.5mM;可用 25mM MgCl20.5mM为间隔摸索Mg2+佳使用浓度。

    **推荐引物终浓度为0.2~0.4μM,效果不佳时可在0.1~1μM间进行调整。

    ***基因组 DNA 推荐用量为10~400ng,模板为质粒或病毒DNA时,推荐用量为10pg~20ng。

    2. PCR反应条件

    95℃

    3~5min

    预变性

    95℃

    15sec

    30~35cycles

    55℃*

    20sec

    72℃

    60sec/kb

    72℃

    5min

    终延伸

    *退火温度需要根据引物的Tm值进行调整,一般设置成低于引物Tm值3~5℃。


  • 注意事项

    1.请于使用前确保产品完全解冻,彻底混匀后短暂离心,置于冰上备用。

    2.多次反复冻融可能会影响产品的性能。

    3.该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。

    4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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Product Q&A FAQ
产品问答FAQ
  • Q-PCR实验中熔解曲线异常

    解决方案:

    1.优化引物设计,提高退火温度。

    2.使用探针法减少非特异性扩增。



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