
Hot Start Taq DNA Polymerase是重组Taq DNA Polymerase经化学修饰后得到的热启动Taq酶。在常温或低温下该酶没有活性,经95℃孵育5min后酶活性完全释放。具有5’-3’DNA聚合酶活性和5’-3’外切核酸酶活性,无3’-5’外切酶活性,延伸速度为1kb/分钟,产物3’端带A,可直接用于TA载体克隆。PCR中使用热启动Taq酶可以有效保证产物的特异性,大限度抑制非特异扩增,适用于从复杂模板中扩增PCR产物以及多重PCR/qPCR反应。
1单位(U) Taq DNA Polymerase活力定义为在74℃、30min内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,将10nmol 脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。本产品的浓度为5U/ul。

1. PCR 反应液组成(50μL)
试剂 | 体积 |
Hot Start Taq DNA Polymerase(5U/μl) | 0.5ul |
10×Taq Buffer(Mg2+free) | 5ul |
25mM MgCl2 | X ul* |
dNTP(10mM each) | 1ul |
正向引物(10μM) | 1~2ul** |
反向引物(10μM) | 1~2ul** |
模板DNA | <500ng*** |
DNase-Free Water | Up to 50μl |
*推荐Mg2+终浓度为1.5~2.5mM;可用 25mM MgCl2以0.5mM为间隔摸索Mg2+佳使用浓度。
**推荐引物终浓度为0.2~0.4μM,效果不佳时可在0.1~1μM间进行调整。
***基因组 DNA 推荐用量为10~400ng,模板为质粒或病毒DNA时,推荐用量为10pg~20ng。
2. PCR反应条件
95℃ | 3~5min | 预变性 |
95℃ | 15sec | 30~35cycles |
55℃* | 20sec | |
72℃ | 60sec/kb | |
72℃ | 5min | 终延伸 |
*退火温度需要根据引物的Tm值进行调整,一般设置成低于引物Tm值3~5℃。

1.请于使用前确保产品完全解冻,彻底混匀后短暂离心,置于冰上备用。
2.多次反复冻融可能会影响产品的性能。
3.该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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解决方案:
1.优化引物设计,提高退火温度。
2.使用探针法减少非特异性扩增。
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