蛋白酶抑制剂混合液(100x)
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240.00
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1ml
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产品详情
  • 产品介绍

    蛋白酶抑制剂是指与蛋白酶分子活性中心上的一些基团结合,使蛋白酶活力下降甚至消失但不使蛋白变性的物质,并维持原有的蛋白间相互作用。细胞或组织提取物等样品中含有许多内源性的蛋白 酶、磷酸酶等,容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰,从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物等样品中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。

    蛋白酶抑制剂混合液(100X) 是一种通用型用于细胞或组织蛋白提取等的蛋白酶抑制剂混合物,主要由 AEBSF、Aprotin in、Bestatin、E-64、Leupep tin、Pep statin A等组成,不含EDTA。本产品 可以有效抑制常规细胞或组织提取物中的各种蛋白酶活性,如丝氨酸蛋白酶、氨基肽酶、半胱氨酸 蛋白酶、苏氨酸、胃蛋白酶、胰蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶和木瓜蛋白酶等。其中 AEBSF 是一种水溶 性的丝氨酸蛋白酶不可逆抑制剂,其抑制常数与PMSF抑制常数相似,可以有效抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、纤溶酶、激肽释放酶和凝血酶等蛋白酶,作为PMSF的替代物,AEBSF 的毒性更低、水 溶性和水溶液稳定性更好。Aprotin in 是丝氨酸蛋白酶的竞争性可逆抑制剂;Bestatin是氨基肽酶可逆抑制剂;E64 是半胱氨酸蛋白酶不可逆抑制剂;Leupep tin 是丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶可逆抑制剂。

    本产品使用便捷,通常以1:100的比例将蛋白酶抑制剂混合液(100X)加入裂解液中,即可用于常规的细胞或组织蛋白的提取,并有效抑制蛋白降解,提取出的蛋白可以用于Western Blot、免疫共沉淀等试验。


  • 操作步骤

    1. 开盖前请低速离心一下,以便将黏附于管壁的液体甩至管底。

    2. 本蛋白酶抑制剂混合液为100X的储存液,使用时按照1:100的比例加入到裂解液中(例如1ml裂解液中加入10ul蛋白酶抑制剂混合液),混匀后即可使用。
    3. 待所需的抑制剂添加完毕并混匀后,就可以开始进行常规细胞或组织的裂解和蛋白提取。


  • 注意事项

    1. 本产品可以适当分装后保存,并应在临使用前添加到裂解液等适当溶液中。

    2. 本产品保存时尽量减少反复冻融的次数,以免失效。

    3. 本产品未添加 EDTA,可以自行选择性加入使用。若后续用于检测提取液中金属蛋白酶活性,则不宜添加EDTA。

    4. 本产品中含有的蛋白酶抑制剂对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。

    5. 含有蛋白酶抑制剂混合液的裂解液宜现用现配,不宜配制后冻存待后续使用。

    6. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

    7. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作


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Product Q&A FAQ
产品问答FAQ
  • Western Blot(WB)实验中有很多杂带咋回事?

    答:可能的原因有:

    1、目的蛋白有多个修饰位点,本身可以呈现多条带,建议查阅文献或进行生物信息学分析,获得蛋白序列的修饰位点信息,通过去修饰确定蛋白实际大小;

    2、样本处理过程中目的蛋白发生降解,建议加入蛋白酶抑制剂;样本处理时在冰上操作;

    3、杂蛋白多,建议处理目的蛋白;

    4、抗体特异性不强,建议使用特异性强的抗体;

    5、抗体孵育时间过久,建议减少抗体孵育时间;

    6、二抗与抗原有交叉反应,建议选择合适的封闭物;

    7、二聚体或多聚体存在,建议增加蛋白质变性过程及强度;

    8、底物显色与曝光时间过长,建议缩短显色及曝光的时间。


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