PMSF即Phenylmethanesulfonyl fluoride,中文名为苯甲基磺酰氟。分子式为C7H7FO2S,分子量为174.19,纯度>99%。
PMSF为常用生化试剂,采用进口试剂配制,用于抑制丝氨酸蛋白酶,如胰蛋白酶,胰凝乳蛋白酶,同时也可抑制半胱氨酸蛋白酶和乙酰胆碱酯酶,其有效浓度为0.1~1mM。
使用前PMSF充分溶解混匀,根据溶液的量加入PMSF,使其终浓度达到1mM。
1、本产品对人体有毒,操作时请特别小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
2、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。 Ø
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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答:可能的原因有:
1、目的蛋白有多个修饰位点,本身可以呈现多条带,建议查阅文献或进行生物信息学分析,获得蛋白序列的修饰位点信息,通过去修饰确定蛋白实际大小;
2、样本处理过程中目的蛋白发生降解,建议加入蛋白酶抑制剂;样本处理时在冰上操作;
3、杂蛋白多,建议处理目的蛋白;
4、抗体特异性不强,建议使用特异性强的抗体;
5、抗体孵育时间过久,建议减少抗体孵育时间;
6、二抗与抗原有交叉反应,建议选择合适的封闭物;
7、二聚体或多聚体存在,建议增加蛋白质变性过程及强度;
8、底物显色与曝光时间过长,建议缩短显色及曝光的时间。
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