产品简介
苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色,简称HE染色,是病理学常规制片中最基本的染色方法,应用极其广泛。苏木精是从原产中南美的洋苏木中提取出来的浅黄褐色的结晶,是一种碱性染色剂,它在被氧化后生成苏木素,同媒染剂(常用的是三价的铝或盐铁)一起使用,能够使细胞核染色。在病理诊断、教学和科研工作中,常用HE染色对正常组织和病变组织进行形态结构观察。对于确定或鉴别病变组织、细胞中出现的某些异常物质与特殊成分,而需要采用的特殊染色方法、酶组织化学方法、免疫组织化学方法等也均是在观察HE染色组织切片的基础上进行的。在HE染色的组织切片中,细胞核呈蓝色,细胞浆呈红色,二者形成鲜明的对比,易于观察分析。
苏木素伊红染色液中,苏木素染色液采用自主研发的配方,由进口的高纯度苏木精、氧化剂等组成,不含氧化汞、甲醇等有害物质,对细胞核染色效果好。其特点是不易产生沉淀和金属; 应用范围广,可以用于人、动物、畜牧、水产等领域,可以用于组织石蜡切片、冰冻切片和组织细胞的染色等;苏木素染色液可以重复使用。
保存:室温保存12个月
使用方法
1、实验前准备 自备苏木素分化液(推荐 PMK0555)、苏木素返蓝液(推荐 PMK0556)、二甲苯、梯度乙醇、中性树胶等。
2、样本前处理
(1) 对于石蜡切片:切片依次经二甲苯脱蜡 10 min,更换新鲜的二甲苯脱蜡 10 min,无水乙醇 5min,新 鲜无水乙醇 5 min,90%乙醇 5 min,75%乙醇 5 min,自来水洗。
(2) 对于冰冻切片:-20℃保存的冰冻切片需静置 5-10 min 恢复至室温。如需固定,则经所需固定液室温 后自来水洗。
3、HE 染色
(1) 苏木素染色:上述处理好的切片,进入苏木素染液染色 3-5 min,自来水洗;
(2) 分化:切片经苏木素分化液 2-5 s,自来水流水充分冲洗;
(3) 返蓝:苏木素返蓝液返蓝 2-5 s,自来水流水充分冲洗;产品说明书 Pumoke (Wuhan) Biotechnology Co., Ltd 027-87888039/41 www.biopmk.com
(4) 伊红染色:切片依次经 85%、95%梯度乙醇脱水,各 5 min。然后进入伊红染液(醇溶)中染色 5 min,经 两次无水乙醇脱水各 5 min;
(5) 透明:切片再经新鲜无水乙醇脱水 5 min,二甲苯透明 5 min,更换新鲜的二甲苯再透明 5 min。
(6) 封片:滴加中性树胶进行封片。
注意事项
染色后用苏木素分化液将组织中过多结合的染液脱去。在 HE 染色种常用低浓度盐酸作为分化液,因为酸 能破坏苏木素的醌型结构结构,使色素与组织分离而褪色。组织在经苏木素染色后,必须经过分化去除组织 中过多结合及非特异性吸附的染料,才能进行伊红染色,确保细胞核与胞浆显色分明。可使用 PMK0555 苏木 素分化液。分化过程中,根据组织切片厚度、组织类型等结合镜下观察适当调整分化时间。
HE 染色中苏木素染色后的返蓝很重要。苏木素在酸性条件下为离子状态,呈红色;在碱性条件下呈 蓝色。组织切片经酸性分化液分化后呈红色或粉红色,需立即水洗终止分化,再用弱碱性溶液使苏木素,这个过程就是返蓝作用。如果没有专用的返蓝液,用温水浸洗也能使细胞核返蓝,只是所需时间 略长。推荐 PMK0556 苏木素返蓝液。
苏木素及伊红染色程度可以根据染色需要进行调整染色时间。
苏木素染液可重复使用多次,每次用完后需密封保存,防止有效成分挥发。当组织或细胞着色明显偏 浅或颜色异常时请更换新的染液。
用于染色后脱水的无水乙醇纯度需大于 99.9%。如果乙醇含水,伊红会褪色导致染色不均匀。
6. 伊红染液(醇溶)可反复使用数次,用完后注意密封保存,防止有效成分挥发。当组织着色明显偏浅时 建议更换新的染液。
7.切片脱蜡应尽量干净。系列乙醇应经常更换新液。 8.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
货号 名称 规格
PMK0270 苏木素-伊红染色液(醇溶) 2*100ml/2*500ml
注意事项
切片脱蜡应尽量干净。系列乙醇应经常更换新液。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。