产品简介：
本公司生产的无血清细胞冻存液是一种不含血清、无蛋白、无须程序降温并能长期-80℃保存细胞的即 用型细胞冻存液，适用于绝大部分的哺乳动物细胞冻存。本无血清细胞冻存液不含常用的胎牛血清(FBS) 、不 含任何动物来源的蛋白质，能减少细胞污染风险，确保细胞安全； 而且使用本无血 清细胞冻存液，可直接置于-80℃长期保存，无须程序性降温，使用非常便捷。
细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃的液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性长期保存起来，在需要的时候再复苏细胞用于实验。 同时适度地冻存一定 量的细胞，可以防止因细胞被污染或其它意外事件而使细胞无法继续培养，可以起到细胞保种的作用。本产 品无须程序降温，可直接-80℃冷冻。细胞冻存和复苏一般采用“慢冻快融”的方法，在细胞冷冻过程中通常 需要使用细胞冻存盒等程序性降温盒或采取程序性降温步骤。而使用本无血清细胞冻存液，无须程序性降温，可直接置于-80℃冷冻。
本产品配方经过优化，使用本产品冻存的细胞复苏后的存活率高，并能保持良好的细胞活性。经测试，对于冻存复苏存活率较高的HeLa(人宫颈癌细胞) 、BEAS-2B(人正常肺上皮细胞) 等细胞，-80℃冻存一年后，复苏存活率高于90%，对于冻存复苏存活率较低的Jurkat (人T淋巴细胞瘤细胞) 、L929(小鼠成纤维细胞)等细胞，-80℃冻存一年后，复苏存活率高于65% ，与使用含FBS的冻存液效果基本一致，与同类型无血清细胞冻存液相比，效果基本一致或更好 。本产品冻存的某些细胞，甚至置于-20℃冻存6个月，复苏存活率高于50%。
产品内容：
货号 PMK0559 PMK0559
无血清细胞冻存液液 100ml 8×15ml
使用步骤：
细胞冻存步骤
1、常规方法收集对数期的贴壁细胞或者悬浮细胞于试管中。
2、根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所需冻存的细胞数。
3、将所需数目的细胞悬浮液置于离心管中，1000rpm离心5分钟，收集培养细胞沉淀，弃去离心管中的上清。
4、加入适量的本冻存液于离心管中，使细胞浓度约为 5*105-1*107/ml。轻柔地混匀细胞，制成细胞混合液。
5、将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中，建议每管1ml或1.5ml。
6、直接将分装好的细胞冻存管置于-80℃超低温冰箱中，可长期保存。
7、若需液氮长期保存，需先置于-80℃至少一天后方可转至液氮罐中。
冻存细胞复苏步骤
1、从冰箱中取出冻存的细胞，立即置于37℃水浴槽中快速解冻。
2、待冻存管中的细胞混合液完全融化后，立即加入1ml细胞培养基于冻存管中与细胞混合，将其中的混合液移至含有约5ml该细胞培养基的离心管中，1000rpm离心5分钟，收集冻存细胞沉淀，移去上清液(注意勿将细胞沉淀倒掉)。
3、加入适量的新鲜培养基，使用移液管缓缓加入细胞沉淀中，轻柔混匀，将混匀好的细胞移至事先准备好的培养容器中。
4、镜检观察，待细胞状态恢复后可进行其他研究或者培养处理。。
注意事项：
1. 对于某些特殊细胞或特别珍贵的细胞，建议同时使用常规的含FBS的冻存液进行对比测试，确认复苏存活率后再使用本产品。
2. 本产品含 DMSO，对DMSO敏感的细胞，建议进行冻存的预实验。
3. 对于不太珍贵的常见细胞，推荐使用本无血清细胞冻存液可直接置于-80℃长期保存，这样使用和操作更加便捷。但对于比较珍贵的细胞或者复苏效率比较低的细胞，如果希望获得更好的冻存和复苏效果，建议使用细胞冻存盒等进行程序性降温冻存，并在-80℃放置至少24小时后转移至液氮中保存。
4. 使用前需确保细胞冻存液完全融化，并轻轻混匀。融化后的细胞冻存液置于 4℃保存，三个月内有效。
5.请确保冻存前细胞生长情况良好，冻存时活细胞比例通常宜大于90%。
6. 加入细胞冻存液并混匀后须尽快移入-80℃超低温冰箱内保存。-80℃超低温冰箱内保存时，请将冻存细胞置于-80℃超低温冰箱内部，避免频繁打开冰箱门导致门边的温度发生变化而使冻存效果变差。
7.请使用耐受有机溶剂的marker笔进行标记， 以防标记被酒精或异丙醇等有机溶剂擦掉，而不能辨识。
8. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
