产品简介:
Hoechst 33342,也称bisBenzimide H 33342或HOE 33342。分子式为C27H28N6O·3HCl·3H2O,分子量为615.99,CAS Number 23491-52-3。Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。Hoechst 33342的最大激发波长为346nm,最大发射波长为460nm;Hoechst 33342和双链DNA结合后,最大激发波长为350nm,最大发射波长为461nm。本Hoechst 33342染色液可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色,也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。
产品内容:
货号 名称 PMK0621-10 PMK0621-50
PMK0621 Hoechst 33342染液(10ug/ml) 10ml 50ml
使用步骤:
1. 对于固定的细胞或组织:
a.对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33342染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的Hoechst 33342染色。
b.对于贴壁细胞或组织切片,加入少量Hoechst 33342染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5分钟。
c. 吸除Hoechst 33342染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
d.直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
2. 对于活细胞或培养的组织:
a. 加入适当量Hoechst 33342染色液,必须充分覆盖住待染色的样品,通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液,对于96孔板一个孔需加入100微升染色液。
b. 在适宜于细胞培养的温度培养20-30分钟。弃染色液,用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。细胞发生凋亡时,在荧光显微镜下观察会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
注意事项:
1.本公司生产的Hoechst 33342 染色液的浓度经过优化,确保可以满足各种常规染色的需要。
2.荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。活细胞或组织染色后宜立即观察。
3.Hoechst 33342对人体有害,请注意适当防护。
4.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
5.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。