产品简介：
Super Green是一种新型无毒核酸染料。这种独特的油性大分子，不易挥发升华、不容易吸入人体，不能穿透细胞膜进入活体细胞内，且在凝胶染色浓度下没有诱变性，具有使用安全、检测灵敏等特点，可以作为各种核酸电泳的染色剂，适用于各种片段大小染色。与标准凝胶成像系统和可见光激发的凝胶观察装置完美兼容，适用于紫外凝胶成像系统或蓝色可见光激发的凝胶观察装置
产品特点：
1. 相对安全：尽管可以穿透细胞膜进入细胞内，属于花菁染料，使用相对安全，实验显示在工作浓度(凝胶染色浓度)下没有发现致突变性，可以代替致癌物溴化乙锭EB作为各种核酸电泳的染色剂。
2. 高灵敏：紫外凝胶透射仪下灵敏度高 EB 染色法 5-10 倍，可见光透射仪下的灵敏度比 EB 染色法高20~30 倍。
3. 信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。
4. 操作简单：无须脱色或冲洗，即可用紫外凝胶透射仪观察或可见光透射仪观察。
5. 适用范围广：可适用于多种电泳分析，如琼脂糖凝胶电泳和 PAGE 凝胶电泳。
6. 使用方便：不影响其它修饰酶作用(如：Taq 酶、内切酶、T4 连接酶、反转录酶等)。
操作步骤：
1.胶染法(用法同EB)
1) 制胶时加入 Super Green I 核酸染料。冷却胶到 50℃左右，每 100ml 胶中加入1-3µl Sybr Green I 核酸染料。
2) 按照常规方法进行电泳即可。
3) 用紫外凝胶透射仪或可见光透射仪观测。蓝光可透过玻璃， 观测聚丙烯酰胺凝胶时，可直接将托有凝胶的玻璃平皿放入可见光透射仪内观测。
*注：此方法染色能准确确定片段分子量且用量较少。1ml 染料可以做 1000 块10 ml 胶，每块胶点 50 个样，可做 50000 次。
2.点染法
1) 该方法适于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳。
2) 工作液的配制：用电泳缓冲液将10000×的Super Green I 稀释100倍，即为Super Green I 工作液。Super Green I 工作液可以置2～8℃保存一个月以上, 浓缩液在-20℃保存半年。
3) 制胶：按常规方法制胶，不含任何染料。
4) 样品染色：向分析样品中加入Super Green I工作液和载样缓冲液，室温放置10分钟，使Super Green I与样品中DNA充分结合。Super Green I 工作液加入量为总上样量的1/5～1/10。
5) DNA Marker染色：将5μL DNA Marker、5μL DNA Marker稀释液和1μLSuper Green I 工作液混匀，室温放置5分钟，使Super Green I 与DNA充分结合。
6) 上样、电泳：按常规操作。用紫外凝胶透射仪或可见光透射仪观测。蓝光可透过玻璃， 观测聚丙烯酰胺凝胶时，可直接将托有凝胶的玻璃平皿放入可见光透射仪内观测。
*注：用点染法染色时，灵敏度最高，染料用量最少。通常点一个样加入 1µL 即 可，可以使用 10000 次, 但大片段稍有滞后现象，如果需要更准确确定分子量(与Marker 对比)，建议使用胶染法。
3.泡染法
1) 按照常规方法进行制胶，其中不含任何染料。
2) 用 pH 7.0 - 8.5 的缓冲液(如：TAE, TBE)，按照 1﹕1000 的比例稀释 Sybr Green I
3) 核酸染料，混匀，制成染色溶液。
4) 将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中，放入凝胶，用铝箔等盖住容器使染料避光。 室温振荡染色 10-30 分钟，染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝胶直 接在玻璃平皿上染色，将配好的稀释溶液轻轻地倒在胶板上，让稀释液均匀地覆 盖整个胶板，并染色 30 分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理（避免染料吸附在玻璃表面上）。
5) 用紫外凝胶透射仪或可见光透射仪观测。蓝光可透过玻璃， 观测聚丙烯酰胺凝胶时，可直接将托有凝胶的玻璃平皿放入可见光透射仪内观测。
*注：用泡染方法染色时，可以精确确定核酸片段分子量。但染料用量是三种方法中用量最大的。
注意事项：
1．Super Green核酸染料样品点染方法中，电泳不要超过 2 小时，以免核酸染料从 DNA/RNA 上分离出来，产生弥散状条带。
2．用点染方法染色时，条带稍有滞后现象，如果需要确定片段精确分子量（和 Marker 对比），建议用胶染法和泡染法。
3．常规用酒精沉淀核酸过程中，Super Green I 核酸染料可以全部从核酸上去掉。
4．DNA电泳请选择 SuperGreen I 染料，RNA 电泳请选择Super Green II染料，两种染料不通用。
5．Super Green I 核酸染料对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染 色等使用过程中用聚丙烯类容器。
6．可以加Orange Red 作为标记pH值在7.5-8.3之间,不要微波加热,加入热胶的温度低于50度。
