产品简介:
超氧化歧化酶D-虫荧光素(D-Luciferin)是萤火虫荧光素酶底物,其量子效率为0.88。反应原理:首先,在镁离子存在下荧光素酶使荧光素与ATP反应,接着它被氧化形成二氧杂环丁烷结构并发出黄绿色的光。Luciferin-luciferase发光用于ATP监控以测定细胞活力以及细菌计数。它还用于报告基因检测。可与小动物活体成像系统配套使用,用于标记LUC基因后的体内活体荧光检测。
操作步骤:
1. 活体成像分析方法
(1)用DPBS(w/o Mg2+、Ca2+)配置D-Luciferin工作液(15mg/mL)* ,0.2 μm滤膜无菌过滤。
(2)注射量:10μL/g的体重,如10g 重小鼠,注射100μL 工作液(1.5 mg D-Luciferin)。
(3)腹腔注射10~15分钟后,上机进行图像分析。
2. 体外分析方法
(1)用无菌水配置200× 的D-Luciferin储备液(30mg/mL)*,立即使用,或-20℃保存。
(2)用预热好的完全培养基1∶200稀释D-Luciferin储备液,配置工作液(150μg/mL)。
(3)去除培养细胞的培养基。
(4)进行图像分析前,向细胞中添加1× 的D-Luciferin工作液,进行图像分析**。
* :溶解D-Luciferin时要完全。
**:在图像分析前,将细胞进行37℃的短时间培养可以增加信号强度。