产品简介:
Rhodamine 123是一种可对活细胞线粒体染色的细胞染色试剂。它可透过细胞膜且在活细胞的线粒体内聚集,并发出黄绿色荧光。Rh123的最大激发波长为507nm,最大发射波长为529nm。
Rh123用于对许多种细胞进行染色,包括植物细胞和细菌。由于细胞内ATP的量与Rh123的荧光强度之间有相关性,因此Rh123被应用于检测细胞内的ATP。Rh123还用于癌症研究。
操作步骤
(1)将0.4mg Rh123溶解到1mL DMSO中制备成1mM Rh123-DMSO溶液。
(2)用载玻片准备细胞。细胞数目应为5×104~5×105个/mL。
(3)孵育该载玻片,用PBS或Hank’s液洗涤细胞。
(4)用培养基稀释1mM Rh123溶液以制备1~20µM Rh123缓冲液。
(5)将Rh123缓冲液加入载玻片并在37℃下孵育30分钟至1小时。
(6)去除Rh123缓冲液并用培养基洗涤细胞(洗涤细胞后为了固定,加入10%福尔马林缓冲液并孵育15~20分钟,接着用PBS洗涤)。
(7)用带有荧光素滤光片的荧光显微镜观察细胞。