产品简介:
超氧化物阴离子荧光探针即二氢乙锭(Hydroethidine,Dihydroethidium, DHE)是一种最常用的荧光检测探针,可以直接用于活细胞的标记。DHE 被活细胞摄入后,可以在细胞内的超氧化物阴离子作用下脱氢,产生 ethidium。Ethidium (例如溴化乙锭)可以和 RNA 或 DNA 结合产生红色荧光。当细胞内的超氧化物阴离子水平较高时,产生的 ethidium 较多,红色荧光就较强,反之则较弱。这样就可以用 DHE 进行超氧化物阴离子水平的检测。 DHE本身为蓝色荧光,最大激发波长为 370nm,最大发射波长为 420nm,脱氢后和RNA 或DNA 结合产生红色荧光,最大激发波长为 300nm,最大发射波长为 610nm,实际观察时也可以使用 535nm 作为激发波长。
操作步骤:
DHE可以溶解于DMSO,配制成适当的母液。用于细胞内超氧化物阴离子检测时,DHE的常用浓度为 1-10μM。通常用含有 0.5-5μM的DHE溶液和细胞一起在 37℃孵育 30 分钟左右进行荧光探针装载,随后可以适当洗涤,接着可以直接用流式细胞仪或其它适当荧光检测仪器进行检测。
注意事项:
1、 DHE 易在空气中氧化,请尽量避免暴露于空气中。
2、 DHE 脱氢后产生毒性较高的 ethidium,请注意防护。
3、 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
4、 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。