产品简介
哺乳动物血液中的葡萄糖称为血糖，血糖是糖在体内的运输形式。血糖浓度受神经系统和激素的调节而保持相对稳定，调节失衡时出现高血糖和低血糖。糖尿病、颅内压增加和脱水症等均可引起高血糖；饭后精神紧张会引起生理性高血糖。胰岛 β 细胞增生，胰岛 β 细胞瘤，垂体、肾上腺皮质和甲状腺功能减退以及严重肝病患者均会引起低血糖；饥饿和剧烈运动可引起暂时的低血糖。血糖水平是许多代谢疾病的关键诊断参数，因此血糖的检测在疾病研究和药物开发过程中非常重要。本试剂盒可检测血液样本中葡萄糖含量，原理是葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸，并产生过氧化氢；过氧化物酶催化过氧化氢氧化 4-氨基安替比林和酚缩合成红色醌类化合物，其最大吸收峰在 505nm，在一定的浓度范围内葡萄糖含量与505nm吸光度成线性关系，根据标准曲线即可计算出样品中葡萄糖的含量。
产品内容
试剂盒组分 | 规格 | 储存条件 | |
48T | 96T | ||
试剂一 | 5mL | 10mL | 4℃避光保存 |
试剂二 | 5mL | 10mL | 4℃避光保存 |
标准品 | 1mL | 1mL | 4℃保存 |
自备耗材
酶标仪或可见光分光光度计（能测505nm处的吸光度）
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
恒温箱、低温离心机
去离子水
试剂准备
注意：各组分（小管试剂）开盖前，请先低速离心。
试剂一：即用型；使用前，平衡到室温；4℃避光保存。
试剂二：即用型；使用前，平衡到室温；4℃避光保存。
混合试剂：使用前将试剂一和试剂二等体积混合，按需求配置。
标准曲线设置：按下表所示用去离子水将 4 mmol/L 标准品稀释为 4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625 mmol/L 的标准溶液。
标准品体积 | 去离子水体积（µL） | 浓度（mmol/L） | |
Std.1 | 200 µL 4 mmol/L | 0 | 4 |
Std.2 | 100 µL of Std.1 (4 mmol/L) | 100 | 2 |
Std.3 | 100 µL of Std.2 (2 mmol/L) | 100 | 1 |
Std.4 | 100 µL of Std.3 (1 mmol/L) | 100 | 0.5 |
Std.5 | 100 µL of Std.4 (0.5 mmol/L) | 100 | 0.25 |
Std.6 | 100 µL of Std.5 (0.25 mmol/L) | 100 | 0.125 |
Std.7 | 100 µL of Std.6 (0.125 mmol/L) | 100 | 0.0625 |
样本制备
注意：推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存6个月。
直接测定，根据预实验确定稀释倍数。为了找到最佳值并确保读数在标准值范围内，建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
实验步骤
1. 酶标仪或可见分光光度计预热30 min以上，调节波长到505nm，可见分光光度计去离子水调零。
2. 样本测定：在96孔板或微量玻璃比色皿中依次加入下列试剂
空白孔（μL） | 标准孔（μL） | 测定孔（μL） | 对照孔（μL） | |
样本 | 0 | 0 | 20 | 20 |
标准液 | 0 | 20 | 0 | 0 |
去离子水 | 20 | 0 | 0 | 180 |
混合试剂 | 180 | 180 | 180 | 0 |
3. 混匀，置于37℃保温15min后于505nm处读取吸光值；计算测定管ΔA测定=A测定-A对照，ΔA标准=A标准-A空白。
注意：1.空白孔只需测一次；对照孔是为了扣除样本本身的颜色，如果样本没有明显颜色可不设置对照管，计算ΔA测定=A测定-A空白。
2.实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA测小于0.005可适当加大样本量。如果ΔA测大于1.5，样本可用去离子水进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数。
结果计算
1．标准曲线的绘制：
以标准液浓度为 y 轴，ΔA标为 x 轴，绘制标准曲线。将ΔA测定带入方程计算出y（mmol/L）
2．血糖含量的计算：
血糖含量(mmol/L) =y×n
n为稀释倍数
结果展示
典型标准曲线-以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
