产品简介:
本试剂盒提供了简单又快速的10% SDS-PAGE彩色(红色)凝胶配制试剂,采用上层胶(也称浓缩胶、积层胶)和下层胶(也称分离胶)的预混配方,只需加入改良型促凝剂即可快速制备凝胶,避免的传统制胶法中TEMED的恶臭味,保护了实验人员的身体健康,可在短时间内制备多块凝胶,无需计算所需溶液量,无需稀释,操作简便,无需压胶操作。且使用本产品所配置的上层胶带有颜色(红色),使得蛋白点样孔清晰呈现,实现了加样过程的可视化,极大的提高了加样效率,有利于点样和控制电泳进程。本产品上层胶中的(红色)染料可在上层胶中稳定存在,不会随着电泳而迁移至下层胶,不会影响电泳和蛋白染色效果,电泳完成后也便于识别上层胶并切除,不影响后续Western Blot等实验。
本产品的改良型促凝剂具有更好的稳定性和催化效能,配制过程中无需额外添加TEMED。为确保实验效果和方便吸取使用,已开盖使用过的改良型促凝剂可置于4°C保存至少3个月。
本试剂盒可制备厚度0.75mm常规尺寸的凝胶50块,具体配制的凝胶块数量与凝胶的厚薄以及凝胶大小有关。
产品内容:
产品编号 | 名称 | 包装及规格 |
PMK1014B-1 | 上层胶溶液 | 30ml x 1 |
PMK1014B-2 | 彩色上层胶缓冲液(红色) | 30ml x 1 |
PMK1014B-3 | 下层胶溶液 | 100ml x 1 |
PMK1014B-4 | 下层胶缓冲液 | 100ml x 1 |
PMK1014B-5 | 改良型促凝剂 | 1ml x 4 |
使用说明:
(以一块0.75/1.0/1.5mm的mini胶为例)
1. 取等体积下层胶溶液和下层胶缓冲液冲液,各2.0/2.7/4.0mL,轻轻混匀。
2. 向步骤1的混合溶液中加入40/60/80μl的改良型促凝剂,轻轻混匀。
3. 将步骤2的混合溶液注入制胶玻璃板中,使液面和短玻璃板上沿之间的距离比梳齿长0.5cm即可。
4. 取等体积上层胶溶液和彩色上层胶缓冲液,各0.5/0.75/1.0mL,轻轻混匀。(由于染料的特殊理化性质,使用前请摇匀)
5. 向步骤4的混合溶液中加入10/15/20μl的改良型促凝剂,轻轻混匀。
6. 灌制完下层胶,无需压胶,无需等待下层胶凝固,立即在下层胶液上面,缓慢将步骤5的混合溶液注入制胶玻璃板中,注意请勿过快,否则会冲散下层胶液面,灌满后插入梳子待凝固(约20- 30min)。
7. 待凝胶全部凝固后,拔去梳齿即可进行后续电泳试验。
下层胶配方 | |||
凝胶 厚度 | 下层胶溶 液 | 下层胶缓冲液 | 改良型促凝剂 |
0.75mm | 2.0mL | 2.0mL | 40uL |
1.00mm | 2.7mL | 2.7mL | 60uL |
1.50mm | 4.0mL | 4.0mL | 80uL |
上层胶配方 | |||
凝胶 厚度 | 上层胶溶 液 | 彩色上层胶缓冲液 | 改良型促凝剂 |
0.75mm | 0.5mL | 0.5mL | 10uL |
1.00mm | 0.75mL | 0.75mL | 15uL |
1.50mm | 1.0mL | 1.0mL | 20uL |
注意事项:
1. 请尽量使用新鲜配制的电泳缓冲液。
2. 本产品制备出的上层胶和下层胶与传统的浓缩胶和分离胶配方一致,针对20-100kDa的蛋白都能有很好的浓缩和分离效果,如果针对更小分子量的蛋白,建议选用普美克的12.5% SDS-PAGE彩色凝胶快速配制试剂盒(PMK1015)效果更好;针对更大分子量的蛋白,建议选用普美克的8% SDS-PAGE彩色凝胶快速配制试剂盒(PMK1016)效果更好。
3. 改良型促凝剂的使用量仅作参考,实际用量可根据个人实验习惯和经验调整,加入较多量的促凝剂可加速凝胶,反之亦然。
4. 凝胶速度与温度有显著的正相关性。同等条件下,温度越高,凝胶速度越快,室温过高时建议适当减小改良型促凝剂的用量,室温较低时,可适当增加改良型促凝剂的用量或延长凝胶时间。
5. 本产品已加入适量TEMED的替代品,如需进一步加速凝胶,临配胶前可按需补充适量TEMED。
6. 在配胶之前,使胶溶液及缓冲液平衡到室温(如室温放置几分钟),可有效避免凝胶中气泡的形成。
7. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
8. 本产品仅限于专业人员的科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。