用途：EDTA抗 原 修 复 液( EDTAAntigen Retrieval solution ， 1 × ) 是 一 种 常 用 的抗 原 修 复 液 ， 可 以 用 于石 蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、 甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。 细胞或组织用多聚甲醛、 甲醛或其它醛类试剂固定后，会导致蛋白之间的交联(cross-link)，从而遮蔽样品 的抗原位点，导致免疫染色时染色信号减弱，甚至出现一些假阳性染色结果 。本抗原修复液采用了广泛使用 的 EDTA，可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，从而 大大改善免疫染色效果。 通常石蜡切片都需进行抗原修复处理，而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片 的免疫染色效果，但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色 效果欠佳时，可以考虑尝试进行抗原修复 。从原理上来看，无论冰冻切片还是细胞爬片等，只要是用多聚甲 醛、 甲醛或其它醛类试剂固定的样品，进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联，充分暴露抗原表位，从 而大大改善免疫染色效果。本产品特别适合用于石蜡切片，也可以用于冰冻切片等其它样品。 按照每个片子需要10ml抗原修复液(1×)计算， 100ml抗原修复液(1×)可以用于10个样本的抗原修复。
产品内容：
货号 |
名称 |
PMK2002-100 |
PMK2002-500 |
PMK2002 | EDTA 抗原修复液（1X ，PH8.0） | 100ml | 500ml |
使用步骤：
1. 对于石蜡切片： a. 脱蜡：切片在二甲苯中脱蜡 5 分钟，再换用新鲜的二甲苯脱蜡，共用二甲苯脱蜡 3 次。无水乙醇 5 分钟， 两次。90%乙醇 5 分钟，两次，70%乙醇 5 分钟，一次。蒸馏水 5 分钟，两次。 b.抗原修复：将切片浸泡在抗原 修复液(1X)中，95-100℃加热约 15 分钟(加热时 间可以控制在 10-20 分钟 内，最佳的加热时间需根据不同的 样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1X)使 用前需预热到 95-100℃ 。加热可以使用普通的水浴锅，也可以 使用微波炉加热 。如果使用微波炉加热，需注 意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在 20-30 分钟内冷却 至室温。用免疫染色洗涤液洗涤 1-2 次，每次 3-5 分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
2. 对于冰冻切片： 用免疫染色洗涤液洗涤切片 5 分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1X)中，95-100℃加热约 15 分钟(加热时间可 以控制在 10-20 分钟内，最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1X)使用前需预热到 95-100℃ 。加热可以使用普通的水浴锅，也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热，需注意避免 暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在 20-30 分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤 1-2 次，每次 3-5 分 钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 3. 对于其它样品的抗原修复，可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。
注意事项： 1.抗原修复过程可以使用染色缸和染色架或邮寄夹进行操作。塑料染色缸、染色架和邮寄夹可以很好地耐受 沸水浴，而玻璃染色缸需避免骤冷骤热导致的玻璃破碎。 2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放 于普通住宅内。 3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
