产品简介:
Super Green(可替代Sybr Green)新型核酸染料是一种油性大分子,不易挥发升华,不易穿透完整细胞膜进入活体细胞内,实验显示在凝胶染色浓度下没有发现诱变性,具有使用相对安全、检测灵敏等特点,可以作为各种核酸电泳的染色剂,适用于各种片段大小染色。与标准凝胶成像系统和可见光激发的凝胶观察装置完美兼容,适用于紫外凝胶成像系统或蓝色可见光激发的凝胶观察装置。
产品特点:
相对安全:油性大分子特点使其不易穿透完整细胞膜进入细胞内,使用相对安全,实验显示在工作浓度(凝胶染色 浓度)下没有发现诱变性,可以代替致癌物溴化乙锭EB作为各种核酸电泳的染色剂。
灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响较小。
稳定性高:适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。
信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。
操作简单:在预制胶和电泳过程中不降解,可直接用可见光凝胶透射仪观察。
适用范围:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可 用于dsDNA、ssDNA 或RNA 染色。
仪器兼容:适用于使用254nm 激发的紫外凝胶成像系统或蓝色可见光激发的凝胶观察装置。它和SYBR Green I的 光谱相似,灵敏度相当,但更加稳定。
操作步骤:
一、琼脂糖凝胶电泳染色 将Super Green绿色荧光核酸染料加入凝胶中
1.制胶:按常规操作,制备琼脂糖凝胶,加入浓缩的10,000x Super Green,使其在凝胶中的终浓度为1x(例如:制备 50ml的凝胶,加入染料5ul),轻轻摇匀,倒胶。
2.按常规方法电泳,观测结果。
二、泡染法
(1) 按照以上常规方法进行电泳。 用于胶回收等高浓度DNA样品强烈推荐泡染法!
(2) 将Super Green 10000x储液稀释约3,300倍到0.1M NaCl溶液中制成3x染色液。例如将15ul Super Green 10,000x原装 液加入到50mL 0.1M NaCl溶液中。
(3) 将凝胶小心放入合适的容器中(如聚丙烯容器中)缓慢加入足量的3x染色液浸没凝胶。室温振荡染色30min左右, 最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含1%的凝胶,染色时间约30min。
(4) 用302nm激发的紫外凝胶成像系统观察结果。
注意事项:
用泡染法染色时,染料用量较多。3x Super Green染色液室温避光保存,可重复使用3次左右。
由于Super Green具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡 或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将Super Green储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其 他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。Super Green兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
如果条带总是弥散或分离不理想,请使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在,则 说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。
Super Green对玻璃器皿和非聚丙烯材料有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。
对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅限于专业人员科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。