产品简介
木质素是构成植物细胞壁的成分之一，具有使细胞相连的作用。木质素存在于木质组织中，是由聚合的芳香醇构成的一类物质，主要作用是通过形成交织网来硬化细胞壁，为次生壁主要成分。木质素主要位于纤维素纤维之间，起抗压作用。本试剂盒提供了一种简便的比色测定法，用于测定样本中的木质素含量。其原理是木质素中的酚羟基发生乙酰化后在280nm处有特征吸收峰，280nm的吸光值高低与木质素含量正相关。在280nm处测定吸光值增加来计算木质素含量。
产品内容
试剂盒组分 | 规格 | 储存条件 | |
48T | 96T | ||
试剂一 | 25mL | 50mL | 4℃保存 |
试剂二 | 25mL | 50mL | 4℃保存 |
试剂三 | 50mL | 100mL | 4℃保存 |
自备耗材
酶标仪或紫外分光光度计（能测280nm处的吸光度）及水浴锅
96孔UV微孔板或微量石英比色皿、可调节式移液枪及枪头
烘箱、粉碎仪（或破壁机）、40目筛
高氯酸
试剂准备
试剂一：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
试剂二：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
试剂三：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
样本制备
植物组织：样品80℃烘干至恒重，粉碎，过40目筛。称取约2mg（记为W）于10mL玻璃试管中（务必用玻璃试管，不可用Ep管）用于测定。
实验步骤
1. 酶标仪或紫外分光光度计预热30min以上，调节波长到280nm，紫外分光光度计试剂三调零。
2. 测定操作表（在玻璃试管中按照如下方式加样）：
空白管 | 测定管 | |
样本（mg） | 0 | 2 |
试剂一（μL） | 500 | 500 |
高氯酸（μL） | 20 | 20 |
于10mL玻璃试管中，用封口膜密封，充分混匀，80℃水浴40min，每隔10min震荡一次，然后自然冷却 | ||
试剂二（μL） | 500 | 500 |
充分混匀，取出20uL至新的玻璃试管中 | ||
上清（μL） | 20 | 20 |
试剂三（μL） | 980 | 980 |
取200μL于96孔UV微孔板或微量石英比色皿，测定280nm处吸光值A。分别记为A空和A测，ΔA=A测-A空
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验，尽量使吸光值在0.1-0.8之间，可调整试剂三的用量，并调整计算公式。试剂三具有刺激性，建议操作过程全部在通风橱进行。加热过程中有剧烈反应，震荡时轻摇，以免压力过大喷出造成人身伤害。试剂一有毒性，请操作时做好防护措施，加热前必须用封口膜密封，以防气体溢出。
结果计算
A. 使用96孔板测定的计算公式
1. 按照样本质量计算
木质素含量（mg/g）=ΔA×V检测÷(ε×d)÷(W×10-3×V上清÷V乙酰化)=4368.3×ΔA÷W
V检测：检测体积，1mL；ε：木质素消光系数，23.35mL/mg/cm；d：96孔板光径，0.5cm；W：样本质量，g；10-3：换算系数，1mg=1×10-3g；V上清：上清液体积，0.02mL；V乙酰化：乙酰化反应体积，1.02mL。
B. 使用微量比色皿测定的计算公式
将上述计算公式中的光径d：0.5cm调整为d：1cm进行计算即可。
注意事项
1. 实验过程中请穿戴实验服、口罩和乳胶手套。请按照生物实验室的国家安全规定进行实验，尤其是在检测血样或其他体液时。
2. 本试剂盒仅用于实验室科学研究，如果本试剂盒用于临床诊断或任何其他用途，我们将不对任何后果负责。
3. 本试剂盒应在有效期内使用，并请严格按照说明书进行存储。
4. 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用；否则，可能导致结果异常。
5. 勤换吸头，避免各组分之间的交叉污染。
PMK1226 木质素过氧化物酶（LiP）检测试剂盒(微量法)
PMK1228 莽草酸脱氢酶（SD）检测试剂盒(微量法)
