产品简介
皂苷（Saponin）是苷元为三萜或螺旋甾烷类化合物的一类糖苷，主要分布于陆地高等植物中，也少量存在于海星和海参等海洋生物中。 许多中草药如人参、远志、桔梗、甘草、知母和柴胡等的主要有效成分都含有皂苷。有些皂苷还具有抗菌的活性或解热、镇静、抗癌等有价值的生物活性。使用超声波提取样品中的皂苷，利用香草醛-高氯酸显色体系测定总皂苷含量。
产品内容
试剂盒组分 | 规格 | 储存条件 | |
48T | 96T | ||
提取液 | 50mL | 100mL | 4℃保存 |
试剂一 | 12mL | 24mL | 4℃避光保存 |
自备耗材
酶标仪或可见光分光光度计（能测589nm处的吸光度）及水浴锅
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
高氯酸、去离子水、乙酸
试剂准备
提取液：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
试剂一：即用型；使用前，平衡到室温；4℃避光保存。
样本制备
植物组织：样本烘干，粉碎过筛，称取0.05g，加入1mL提取液，超声提取1h；8000g，25℃离心10min，取上清待测。
注意：推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存6个月。
实验步骤
1. 酶标仪预热30min以上，调节波长至589nm。
2. 测定管：取0.5mL上清，70℃挥发至干。加入0.2mL试剂一和0.8mL高氯酸，55℃水浴20min。吸取40μL加入96孔板中，再加入200μL乙酸，充分混匀后，589nm下测定吸光度A1。
3、空白管：取0.5mL提取液，70℃挥发至干。加入0.2mL试剂一和0.8mL高氯酸，55℃水浴20min。吸取40μL加入96孔板中，再加入200μL乙酸，充分混匀后，589nm下测定吸光度A2。计算△A= A1-A2。
（空白管只需做1管）
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA小于0.005可适当加大样本量。如果ΔA测大于2.0，样本可用提取液进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数。
结果计算
1.以齐墩果酸为对照品计算
标准状态下的回归曲线为：y = 0.0036x - 0.012，R2 = 0.9968，x为对照品浓度，μg/mL,y为吸光度△A。
总皂苷含量(μg/g干重)=（△A+0.012）÷ 0.0036×V样÷(V样÷V样总×W)
=277.78×（△A+0.012）÷W
2. 以人参皂苷Re为对照品计算
标准状态下的回归曲线为：y = 1.0233x - 0.0016，R2 = 0.9983，x为对照品浓度，mg/mL,y为吸光度△A。
总皂苷含量(μg/g干重)=（△A+0.0016）÷ 1.0233×V样÷(V样÷V样总×W)×1000
=977.23×（△A+0.0016）÷W
V样：加入样本体积，0.5mL；V样总：加入提取液体积，1mL；W：样本干重，g；1000，毫克到微克的换算系数。
