产品简介
钾保持机体的正常渗透压及酸碱平衡,参与糖及蛋白代谢,保证神经肌肉的正常功能。高血钾可使神经、肌肉应激性增高,使心肌应激性降低,导致心动过缓;低血钾可引起肌无力甚至肌肉弛缓性麻痹,引起心肌应激性增高,出现心动过速、心律紊乱甚至在收缩期停跳。因此血清钾是常用的生化测定指标。本试剂盒提供了一种简单的方法来检测血清样本中钾离子(K+)含量,其原理是血清中钾离子与四苯硼钠作用,形成不溶于水的四苯硼钾,产生的浊度在一定范围内与钾离子浓度成正比。 通过测定其浊度来测定血清钾含量。
产品内容
试剂盒组分 | 规格 | 储存条件 | |
48T | 96T | ||
提取液 | 25mL | 50mL | 4℃保存 |
试剂一 | 2mL | 2mL | 4℃保存 |
试剂二 | 1管 | 1管 | 4℃避光保存 |
试剂三 | 10mL | 20mL | 4℃保存 |
标准品 | 1mL | 1mL | 4℃保存 |
自备耗材
酶标仪或可见分光光度计(能测520nm处的吸光度)及水浴锅
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
低温离心机、制冰机
去离子水
试剂准备
提取液:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
试剂二工作液:临用前配制,取试剂一,全部加入到试剂二瓶中,混匀,即为试剂二工作液;4℃保存。
试剂三:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
标准品:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
样本制备
血清预处理:取EP管,依次加入50μL血清,450μL 提取液,充分混匀后,室温(25℃左右),8,000rpm,离心10min,取上清液,待测。
实验步骤
1. 酶标仪或可见分光光度计预热30min以上,波长调节到520nm,可见分光光度计去离子水调零。
2. 操作表(96孔板或微量玻璃比色皿中依次加入下列试剂):
试剂(µL) | 空白孔 | 标准孔 | 测定孔 |
去离子水 | 40 | 0 | 0 |
标准品 | 0 | 40 | 0 |
样本 | 0 | 0 | 40 |
试剂二工作液 | 20 | 20 | 20 |
混匀后静置5min | |||
试剂三 | 140 | 140 | 140 |
混匀后测定520nm处吸光度值A空、A标、A测。计算ΔA测=A测-A空,ΔA标=A标-A空
注意:空白孔和标准孔均只需测定1次。实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA测大于1.5,样本可用去离子水进一步稀释,计算结果乘以稀释倍数。
结果计算
血钾浓度(mmol/dL)=(C标准品×ΔA测÷ΔA标)×n=0.5×ΔA测÷ΔA标
C标准品:0.5mmol/L;n,样品稀释倍数=(50μL血清+450μL提取液)÷50 μL血清=10;单位换算 1L=10dL。