产品简介
血钠在维持正常的细胞外液容量和渗透压,以及体液的酸碱平衡中起重要作用。本试剂盒提供了一种简单的检测方法,用于检测血清样本中钠含量,其原理是血清中的钠与焦锑酸钾试剂在弱碱性溶液中生成沉淀,沉淀的多少与钠浓度成正比,根据其浊度可测定血清中钠含量。
产品内容
试剂盒组分 | 规格 | 储存条件 | |
48T | 96T | ||
试剂一 | 15mL | 30mL | 4℃保存 |
标准品 | 1mL | 1mL | 4℃保存 |
自备耗材
酶标仪或可见分光光度计(能测520nm处的吸光度)
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
低温离心机、水浴锅
无水乙醇、90%乙醇
试剂准备
试剂一:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。如果出现胶状物,置于沸水浴中加热溶解后再用。
标准品设置:按下表所示,用90%乙醇将标准品1mol/L稀释为0.05、0.04、0.03、0.02、0.01、0.005、0.0025 mol/L的标准溶液。
1mol/L标准品体积(µL) | 90%乙醇体积(µL) | 标准品浓度(mol/L) | |
Std.1 | 50 | 950 | 0.05 |
Std.2 | 40 | 960 | 0.04 |
Std.3 | 30 | 970 | 0.03 |
Std.4 | 20 | 980 | 0.02 |
Std.5 | 10 | 990 | 0.01 |
Std.6 | 5 | 995 | 0.005 |
Std.7 | 2.5 | 997.5 | 0.0025 |
注意:每次实验,请使用新配制的标准品。
样本制备
血清:取100µL血清,加入900µL无水乙醇,充分混匀,10,000rpm,4℃离心10min,取上清液,置冰上待测。
注意:血液采取过程中,宜空腹采血,避免使用枸橼酸钠抗凝剂。
实验步骤
1. 酶标仪或可见分光光度计预热30min以上,调节波长到520nm,可见分光光度计去离子水调零。
2. 操作表(下述操作在96孔板或微量玻璃比色皿中操作):
空白孔(μL) | 标准孔(μL) | 测定孔(μL) | |
上清液 | 0 | 0 | 20 |
标准品 | 0 | 20 | 0 |
90%乙醇 | 20 | 0 | 0 |
无水乙醇 | 20 | 20 | 20 |
试剂一 | 200 | 200 | 200 |
3. 混匀,室温静置5min,检测520nm处吸光值。空白孔记为A空,标准孔记为A标、测定孔记为A测。计算ΔA测=A测-A空,ΔA标=A标-A空。
注意:空白孔只需测定1次。实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。当测定吸光值大于1时,建议用无水乙醇稀释后测量。
结果计算
标准曲线的绘制
以标准溶液浓度为y轴,ΔA标为x轴,绘制标准曲线(y轴更方便计算结果)。
2. 血钠浓度的计算
将样本的ΔA测带入方程得到y值(mol/L)。
血钠含量(mol/L)=y×样品稀释倍数=10×y
样品稀释倍数:(100 µL血清+900 µL无水乙醇)÷100 µL血清=10。
注意:若样本进一步稀释,则需要再乘以进一步稀释的稀释倍数n。
结果展示
典型标准曲线-以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。