产品简介
血钙几乎全部存在于血浆中,所以血钙主要指血浆钙。血浆钙有离子钙和结合钙两种形式,其中只有离子钙 直接起生理作用,它与结合钙处于动态平衡,并受血液pH的影响。血钙水平与多种重要的生理功能相关,过高或过低都会影响正常生理功能。本试剂盒提供了一种简单的方法来检测血液中游离钙浓度,其原理是在强碱溶液中游离钙与GBHA反应生成红色钙-GBHA复合物,在520nm有吸收峰;通过测定520nm吸光度,计算游离钙浓度。
产品内容
试剂盒组分 | 规格 | 储存条件 | |
48T | 96T | ||
试剂一 | 2.5mL | 5mL | 4℃保存 |
试剂二 | 2.5mL | 5mL | 4℃保存 |
标准品 | 1mL | 1mL | 4℃保存 |
自备耗材
酶标仪或可见分光光度计(能测520nm处的吸光度)及水浴锅
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
无水甲醇、丙酮、去离子水
试剂准备
试剂一:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
试剂二:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
试剂三:自备无水甲醇和丙酮,依次加入9mL无水甲醇和1mL丙酮,盖紧混匀。
标准品:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
样本制备
血清:直接测定。
注意:宜早晨空腹采血,并且采血后应该尽快完成测定。
实验步骤
1. 酶标仪或可见分光光度计预热30min以上,波长调节到520nm,可见分光光度计去离子水调零。
2. 操作表(96孔板或微量玻璃比色皿中依次加入下列试剂):
试剂(µL) | 空白孔 | 标准孔 | 测定孔 |
去离子水 | 12 | 0 | 0 |
标准品 | 0 | 12 | 0 |
样本 | 0 | 0 | 12 |
试剂一 | 50 | 50 | 50 |
试剂二 | 50 | 50 | 50 |
试剂三 | 100 | 100 | 100 |
混匀,静置5min后测定520nm处吸光度值A空、A标、A测。计算ΔA测=A测-A空,ΔA标=A标-A空。30min以内测定结果。
注意:空白孔和标准孔均只需测定1次。实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA测大于1.5,样本可用去离子水进一步稀释,计算结果乘以稀释倍数。
结果计算
血钙含量(μmol/dL)=(C标准品×ΔA测÷ΔA标)=100×ΔA测÷ΔA标
C标准品:1μmol/mL;单位换算 1dL=100mL。
注意事项
1. 实验过程中请穿戴实验服、口罩和乳胶手套。请按照生物实验室的国家安全规定进行实验,尤其是在检测血样或其他体液时。
2. 本试剂盒仅用于实验室科学研究,如果本试剂盒用于临床诊断或任何其他用途,我们将不对任何后果负责。
3. 本试剂盒应在有效期内使用,并请严格按照说明书进行存储。
4. 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用;否则,可能导致结果异常。
勤换吸头,避免各组分之间的交叉污染。