产品简介
磷是植物必需大量元素。植物主要通过根系从土壤中获取磷元素。土壤磷包括有机磷和无机磷。土壤有机磷经过矿化分解而转化为无机磷，才能进一步被植物吸收利用。本试剂盒提供了一种简单易用的比色法，用于分析土壤样本中无机磷含量，其原理是从土壤中提取无机磷，在酸性环境中，通过钼蓝法定磷，钼蓝与磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物质，通过测定660nm光吸收，即可计算无机磷含量。
产品内容
试剂盒组分 | 规格 | 储存条件 | |
48T | 96T | ||
试剂一 | 50mL | 100mL | 4℃保存 |
试剂二 | 2.5mL | 5mL | 4℃保存 |
试剂三 | 粉剂×1瓶 | 粉剂×1瓶 | 4℃，避光保存 |
标准品（100μg/mL标准磷贮备液） | 1mL | 1mL | 4℃保存 |
自备耗材
酶标仪或可见光分光光度计（能测660nm处的吸光值）及水浴锅
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
台式离心机、30-50目筛
去离子水
试剂准备
注意：各组分（小管试剂）开盖前，请先低速离心。
试剂一：即用型；使用前平衡到室温；4℃保存。
试剂二：即用型；使用前平衡到室温；4℃保存。
试剂三：临用前配制，48T加入4mL去离子水，充分溶解后加入2mL试剂二，混匀；96T加入8mL去离子水，充分溶解后加入4mL试剂二，混匀，现用现配。
标准品：临用前取20μL 100μg/mL标准磷贮备液，加入80μL去离子水，充分混匀，配制成20μg/mL标准液使用，现用现配。
注意：试剂三需临用前配制，限当天使用。配制时最好使用新的烧杯、玻璃棒和玻璃移液器，或者 一次性塑料器皿，以避免磷污染。配好的试剂三应为浅黄色。 若无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染。试剂三配制过程中，可能会产生黑色固体，其不影响结果，注意吸取时不要将黑色固体吸入。
样本制备
称取通过30-50目筛目筛子的风干土样约 0.05g，加入1mL试剂一，震荡混匀，然后置于 40℃水浴浸提 1h，8000g，25℃离心 10min， 取上清液代测。
实验步骤
1. 酶标仪或可见光分光光度计预热30min以上，调节波长到660nm，可见光分光光度计去离子水调零。
2. 水浴锅预热到40℃。
3. 样本测定（在EP管中依次加入下列试剂）：
试剂名称 | 空白管（μL） | 标准管（μL） | 测定管（μL） |
待测样本 | 0 | 0 | 10 |
标准品 | 0 | 10 | 0 |
去离子水 | 100 | 90 | 90 |
试剂三 | 100 | 100 | 100 |
充分混匀，40℃水浴保温10min，室温冷却10min后在660nm处读取吸光值。空白管记为A空，标准管记为A标，测定管记为A测。计算ΔA测=A测-A空，ΔA标=A标-A空。空白管和标准管只需测定一次。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA测小于0.005可适当加大样本量。如果ΔA测大于1.0，样本可用试剂一进一步稀释，计算结果乘以最终稀释倍数。
结果计算
无机磷含量的计算：
无机磷含量（μg/g 土样）=C标×（ΔA测÷ΔA标）÷（W÷V样总）=20×（ΔA测÷ΔA标）÷W
C标：标准液浓度，20μg/mL；V样总：试剂一体积，1mL；W：样本质量，g；μg/g 即mg/kg。
注意事项
1. 实验过程中请穿戴实验服、口罩和乳胶手套。请按照生物实验室的国家安全规定进行实验，尤其是在检测血样或其他体液时。
2. 本试剂盒仅用于实验室科学研究，如果本试剂盒用于临床诊断或任何其他用途，我们将不对任何后果负责。
3. 本试剂盒应在有效期内使用，并请严格按照说明书进行存储。
4. 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用；否则，可能导致结果异常。
5. 勤换吸头，避免各组分之间的交叉污染。
