产品简介
土壤中的铵态氮可被土壤胶体吸附，呈交换性铵状态氮肥，也可溶解在土壤溶液中，能直接被植物吸收利用，属于速效性氮素。铵态氮指标对农业生产具有极其重要的作用。本试剂盒提供了一种简单易用的比色法，用于分析土壤样本中的铵态氮含量，其原理是土壤中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，在625nm处有特征吸收峰，吸光值与铵态氮含量成正比，可比色测定计算得铵态氮含量。
产品内容
试剂盒组分 | 规格 | 储存条件 | |
48T | 96T | ||
提取液 | 50mL | 100mL | 4℃保存 |
试剂一 | 粉剂×1瓶 | 粉剂×2瓶 | 4℃，避光保存 |
试剂二 | 4mL | 8mL | 4℃，避光保存 |
试剂三 | 1mL | 2mL | 4℃保存 |
标准品（100μg/mL氮标准液） | 1mL | 1mL | 4℃保存 |
自备耗材
酶标仪或可见光分光光度计（能测625nm处的吸光值）及恒温培养箱
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
台式离心机、振荡仪
去离子水
试剂准备
注意：各组分（小管试剂）开盖前，请先低速离心。
提取液：即用型；使用前平衡到室温；4℃保存。
试剂一：临用前根据用量每瓶加4mL去离子水溶解，现配现用。配制好的试剂一4℃保存不能超过20天。
试剂二：即用型；使用前平衡到室温；4℃避光保存。
试剂三：即用型；使用前平衡到室温；4℃保存。
标准品：临用前取20μL 100μg/mL氮标准液，加入780μL去离子水，充分混匀，配制成2.5μg/mL标准液使用，现用现配。
样本制备
称取约 0.1g新鲜土样，加入1mL提取液，置于振荡仪中提取1h，25℃，10000g离心10min，取上清待测。
注意：1. 样本浸提液最好在当日完成测定，如果不能完成，可冷冻保存，但不能超过两天。
2. 土壤经风干或者烘干很容易引起铵态氮的变化，所以建议采用新鲜土壤进行测定。样品采集后应于4℃下密封运输和保存，并在 3d 内分析完毕。否则，应于-20℃（深度冷冻）下以小块、小份保存，样品中氨氮可以保存数周。当测定深度冷冻氨氮含量时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在 4 h 内完成样 品解冻、匀质化和提取；如果在 4℃下解冻，解冻时间不应超过 48 h。
3. 如果要比较不同样本间的铵态氮含量，需将土样烘干，按干重计算后再进行比较。
实验步骤
1. 酶标仪或可见光分光光度计预热30min以上，调节波长到625nm，可见光分光光度计去离子水调零。
2. 样本测定（在96孔板或微量玻璃比色皿中依次加入下列试剂）：
试剂名称 | 空白孔（μL） | 标准孔（μL） | 测定孔（μL） |
待测样本 | 0 | 0 | 20 |
标准品 | 0 | 20 | 0 |
提取液 | 20 | 0 | 0 |
试剂一 | 80 | 80 | 80 |
试剂二 | 80 | 80 | 80 |
充分混匀，25℃室孵育1h | |||
试剂三 | 20 | 20 | 20 |
充分混匀，在625nm处读取吸光值。空白管记为A空，标准管记为A标，测定管记为A测。计算ΔA测=A测-A空，ΔA标=A标-A空。空白管和标准管只需测定一次。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值大于0.7，样本可用提取液进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数。
结果计算
NH4+-N含量的计算
NH4+-N（μg/g 土样）=C标×（ΔA测÷ΔA标）÷（W÷V样总）=2.5×（ΔA测÷ΔA标）÷W
C标：标准液浓度，2.5μg/mL；V样总：提取液体积，1mL；W：样本质量，g；μg/g即mg/kg。
注意事项
1. 实验过程中请穿戴实验服、口罩和乳胶手套。请按照生物实验室的国家安全规定进行实验，尤其是在检测血样或其他体液时。
2. 本试剂盒仅用于实验室科学研究，如果本试剂盒用于临床诊断或任何其他用途，我们将不对任何后果负责。
3. 本试剂盒应在有效期内使用，并请严格按照说明书进行存储。
4. 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用；否则，可能导致结果异常。
勤换吸头，避免各组分之间的交叉污染
