产品简介
速效磷是土壤中可被植物吸收的磷组分，包括全部水溶性磷、部分吸附态磷、易一部分微溶性的无机磷和易矿化的有机磷等，土壤中速效磷是限制植物生长主要因子之一。本试剂盒提供了一种简单易用的比色法，用于分析土壤样本中的速效磷含量，其原理是用弱碱法提取碱溶性磷和吸附态磷，钼蓝与磷酸根生成660nm 有特征吸收峰的物质，通过测定660nm光吸收， 即可计算磷含量。
产品内容
试剂盒组分 | 规格 | 储存条件 | |
48T | 96T | ||
提取液 | 52.5mL | 105mL | 4℃保存 |
试剂一 | 3mL | 6mL | 4℃保存 |
试剂二 | 粉剂×1支 | 粉剂×1支 | 4℃，避光保存 |
试剂三 | 粉剂×1支 | 粉剂×2支 | 4℃，避光保存 |
标准品（100μg/mL标准磷贮备液） | 1mL | 1mL | 4℃保存 |
自备耗材
酶标仪或可见光分光光度计（能测660nm处的吸光值）及恒温培养箱
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
台式离心机、振荡仪、30-50目筛
去离子水
试剂准备
注意：各组分（小管试剂）开盖前，请先低速离心。
提取液：即用型；使用前平衡到室温；4℃保存。
试剂一：即用型；使用前平衡到室温；4℃保存。
试剂二：临用前48T加1mL去离子水，96T加2mL去离子水溶解，用不完的试剂 4℃避光保存。
试剂三：临用前根据用量每支加1mL去离子水溶解，现配现用。
标准品：临用前取20μL 100μg/mL标准磷贮备液，加入780μL去离子水，充分混匀，配制成2.5μg/mL标准液使用，现用现配。
显色液的配制（可测50个样）：取EP管一支，加入660μL试剂一，再加入100μL试剂二，充分混匀后，再加入240μL试剂三，充分混匀待用；配好的显色液应为黄色，若变蓝则为磷污染；显色液必须现配现用；若一次性测不了50个样，可按比例缩小各试剂体积。
样本制备
新鲜土样风干，过 30-50 目筛，称取约 0.05g 土样，加入 1mL 提取液，振荡提取 1h，10000g ，25℃离心 10min，取 上清液待测。
实验步骤
1. 酶标仪或可见光分光光度计预热30min以上，调节波长到660nm，可见光分光光度计去离子水调零。
2. 样本测定（在96孔板或微量玻璃比色皿中依次加入下列试剂）：
试剂名称 | 空白孔（μL） | 标准孔（μL） | 测定孔（μL） |
待测样本 | 0 | 0 | 40 |
标准品 | 0 | 40 | 0 |
提取液 | 40 | 0 | 0 |
显色液 | 20 | 20 | 20 |
去离子水 | 140 | 140 | 140 |
充分混匀，25℃室孵育30min，在660nm处读取吸光值。空白管记为A空，标准管记为A标，测定管记为A测。计算ΔA测=A测-A空，ΔA标=A标-A空。空白管和标准管只需测定一次。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA测小于0.005可适当加大样本量。如果ΔA测大于1.5，样本可用提取液进一步稀释，计算结果乘以最终稀释倍数。
结果计算
速效磷含量的计算：
速效磷含量（μg/g 土样）=C标×（ΔA测÷ΔA标）÷（W÷V样总）=2.5×（ΔA测÷ΔA标）÷W
C标：标准液浓度，2.5μg/mL；V样总：提取液体积，1mL；W：样本质量，g。
注意事项
1. 实验过程中请穿戴实验服、口罩和乳胶手套。请按照生物实验室的国家安全规定进行实验，尤其是在检测血样或其他体液时。
2. 本试剂盒仅用于实验室科学研究，如果本试剂盒用于临床诊断或任何其他用途，我们将不对任何后果负责。
3. 本试剂盒应在有效期内使用，并请严格按照说明书进行存储。
4. 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用；否则，可能导致结果异常。
5. 勤换吸头，避免各组分之间的交叉污染。
