亚铁氧化酶（Hsphasetin，HP）作为铜蓝蛋白的同系物,是近年来发现的铁转运蛋白。HP催化亚铁离子（Fe2+）氧化为三价铁离子（Fe3+），在介导铁的跨膜转运中有重要作用。本试剂盒提供了一种简便的比色测定法，用于测定样本中的HP活性。其原理是以一定浓度的 Fe2+为底物，在HP的催化作用下Fe2+被氧化为Fe3+，Fe2+可与菲咯嗪形成有色复合物，在562nm处有特征吸收峰，通过测定Fe2+的减少速率可测得亚铁氧化酶的活性。
酶标仪或可见分光光度计（能测 562nm处的吸光度）
96孔板或微量锅、离心机、制冰机
去离子水
匀浆器（如果是组织样本）玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
恒温箱或水浴
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答：如果能够排除下面的几个问题，那么问题多半出现在一抗和抗原制备上。
1、二抗的HRP 活性太强，将底物消耗光；
2、ECL底物中H2O2不稳定，失活；
3、ECL底物没覆盖到相应位置；
4、一抗选择不当；
5、二抗失活。
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