草酰乙酸在三羧酸循环的步中与乙酰辅酶A缩合生成柠檬酸,并在后一步通过苹果酸脱氢酶催化L-苹果酸脱氢再生。它是糖异生的中间体,通过丙酮酸的羧化作用在线粒体中由丙酮酸与CO2生成,随后脱羧和磷酸化形成磷酸烯醇式丙酮酸。另外,它也可以在转氨酶的作用下添加来自谷氨酸的氨基而转化为天冬氨酸。草酰乙酸可降低闭合性头部损伤大鼠模型中的血液谷氨酸水平、神经功能障碍的严重程度和脑水肿。已知也可作为琥珀酸脱氢酶的抑制剂。本试剂盒提供了一种简单、方便、快速的草酰乙酸含量检测方法,其原理是草酰乙酸与固紫B结合形成红色沉淀物质,加入有机溶剂溶解沉淀后,溶液在520nm处有特征吸光值,通过检测520nm处光吸收增加速率可以计算草酰乙酸含量。
酶标仪或分光光度计(能测520nm处的吸光度)
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
水浴锅、制冰机,低温离心机
去离子水
匀浆器(如果是组织样本)
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答:可能的原因包括培养基质量、血清质量、温度、pH值、气体比例等。
解决方法有:
1. 使用高质量的培养基和血清,确保其无菌、无支原体污染,并保证在保质期内使用;
2. 培养箱温度和气体比例要保持稳定,定期校准;
3. 每天检查并记录细胞培养的环境参数,如温度、pH值、气体比例等,以便及时发现问题;
4. 定期更换培养基,保持细胞营养充足;
5. 对于生长缓慢的细胞株,可以尝试进行克隆筛选或更换培养基。
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