抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate resistant acid phosphatase，TRAP）是破骨细胞 的标志性酶，特异性分布于破骨细胞中。TRAP染色试剂盒即是用于显示组织中的破骨细 胞。其中基本原理在于，在含酒石酸的酸性条件下，抗酒石酸酸性磷酸酶TRAP能将萘酚 AS-BI磷酸盐水解，产生的萘酚AS-BI与六偶氮副品红结合，形成非水溶性的酒红色物质 沉积在酶活性原位，从而实现对抗酒石酸酸性磷酸酶的显色和定位。
本产品基本组成成分：反应缓冲液主要成分为醋酸缓冲液及酒石酸钾钠，pH约5.0；副品 红溶液，含5%副品红；亚硝酸钠溶液主要成分为4%亚硝酸钠；AS-BI磷酸盐底物溶液， 主要成分为20 mg/mL萘酚AS-BI磷酸盐。经本产品染色后，破骨细胞中的TRAP呈酒红色 ，定位于细胞浆。按照切片上每个组织点300 μL用量，本试剂盒可以做50次以上TRAP 染色。

配制 TRAP 工作液:
1）取50μL副品红溶液与50μL亚硝酸钠溶液在洁净离心管中混匀，得到六偶氮副品红 溶液；
2）向第1步的100μL六偶氮副品红溶液中加入100μLAS-BI磷酸盐底物溶液， 吹吸数 次充分；
3）吸取1.8mL反应缓冲液加入到第2步的混合液中充分混匀；
4）第3步的混合液经针式滤器过滤（0.45μm 水系滤膜）即得到TRAP 工作液。
注意：务必按照所属顺序配制工作液。每个组织点大约需要200-300μL工作液，根据使 用量配制，现配现用，避免浪费。 石蜡切片操作步骤（供参考）
1.石蜡切片脱蜡至水， 纯水洗数分钟。
2.将切片用组化笔化圈后放在（加有一定量的防止切片蒸干的纯水）湿盒中，用纯水37 ℃孵育2h。
3.切片孵育完成后倾去纯水，滴加过滤好的TRAP 工作液覆盖组织，置于37℃避光反应 20-30 min。
4.（可选，自备相关试剂）复染细胞核：倾去孵育液并水洗，以苏木素染液进行染核。
5.脱水，透明，以中性树胶封片。
细胞爬片操作步骤（供参考）
1.细胞固定：吸除细胞培养液，加入4%多聚甲醛（推荐 G1101）固定15-30min，蒸馏水 洗3次。
2.细胞破膜：以0.2%TritonX-100溶液覆盖细胞进行破膜处理20-30min，蒸馏水轻洗3 遍。
3.孵育染色：将TRAP 工作液加到细胞孔板内覆盖细胞，37℃避光孵育20min，蒸馏水洗 3次。
4.（可选，自备相关试剂）细胞核复染：吸除孵育液并水洗，以苏木素染液进行染核。
5.加入适量无水乙醇脱水，取出孔板中的盖玻片，吹风机吹干，倒扣在洁净的载玻片上 以中性树胶封片。

 1.仅用于科研，不能用于临床诊断。所有产品仅供科研使用，不得用于其他用途。
2.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。