甲苯胺蓝（Toloniumchloride），是一种化合物，分子式为C28H20N2O10S2·2Na，分子量为656.62，甲苯胺蓝深绿色粉末，具古铜色光泽，易溶于水，呈蓝紫色溶液。微溶于醇呈蓝色，极微溶于氯仿，几乎不溶于醚。商品大部分为氯化锌复盐。

甲苯胺蓝属噻嗪类染料,为碱性染料，可作细胞核染色剂。这类染料一般有2个发色团，一个是口印胺基, -个是醌型苯环。醌型苯环有明显的异染性,可分别表示为a异染性(阴性)，呈蓝色，即正染性;β异染性(弱阳 性) ,为紫色或紫红色;γ-异染性(阳性),为红色。 但此种异染性染色后经酒精脱水时，又转变成正色性。

肥大细胞的染色:

（1）组织脱蜡至水。

（2）蒸馏水浸洗2-3次。

（3）甲苯胺蓝染液染20-30min。

（4）稍水洗，洗去多余染色液。

（5）95%酒精分色，在镜下控制分色效果。

（6) 用100%酒精脱水。

（7）二甲苯透明，中性树胶封片。

染色结果：

肥大细胞颗粒呈红紫色，胞核呈蓝色。

细胞涂片染色 ：

（1）细胞涂片后，立即放入95%的乙醇中固定，取出放在纸巾上。

（2）滴加1～2滴稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染，加盖玻片让染料渗透到细胞中。

（3）后将玻片竖起，稍加压力，使多余染料被纸巾吸去。

（4）无需干燥，直接镜检。

染色结果：

细胞核、淋巴细胞呈深蓝色；核仁呈紫红色；红细胞呈橘红；细胞质、单核细胞呈淡蓝色。

原位杂交染色 ：

（1）用蒸馏水或去离子水稀释到相应的浓度，凭经验一般稀释比例大于1:10。

（2） 玻片在稀释好的染色液中短暂浸泡。

（3） 在蒸馏水或去离子水浸泡数次。

（4） 按需求进行压片固定。 

神经元细胞的染色：

（1）将载有细胞的玻片取出放入4％多聚甲醛中固定1h左右；

（2）到时间后取出用PBS冲洗1～2次即可；

（3）然后加入提前预热的1％甲苯胺蓝溶液，在50度左右的气浴或水浴中染色20～30min；

（4）用梯度酒精已次脱水，分别为75％、90％、100％，也可自定梯度；

（5）在镜下控制分色效果，这一步不太好掌握；

染色结果：

可见尼氏小体深蓝色颗粒，细胞核呈淡蓝色，背景基本无色。

1.次使用本试剂时建议先取1-2个样品做预实验。样品数量很多时，可使用染色架和染色缸，以便于操作。

2.本产品为1%浓度水溶液，具体使用浓度可自行稀释。

3.由于温度对染料的溶解度与着色力有很大的影响，若快速染色，当室温较低时，可以适当加温。

4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。