双性福尔马林固定液为甲醛的36%-40%溶液,为无色或几乎无色澄明液体,有刺激性特臭、能刺激鼻喉粘膜;在冷处久置易发生浑浊并可产生沉淀而降低含量。能与水或乙醇任意混合,凝固蛋白质,直接作用于氨基、巯基、羟基和羧基,生成次甲基衍生物,从而破坏机体蛋白质和酶,导致微生物死亡。可杀灭各类微生物,包括细菌芽胞。有机物可明显降低其杀微生物作用。
保存:室温保存,有效期12个月。
根据组织类型及实验目的选择合适的固定液浓度,按标本的5-10的用量将组织标本在室温条件下浸泡固定2-72h(固定时间依据组织块大小和实验目的而定),自来水或缓冲液充分漂洗后即可用于组织切片。
1、甲醛气体穿透力弱,熏蒸消毒时,应使物品的污染表面充分暴露。
2、甲醛的杀菌作用受温度、湿度和有机物影响明显,为此医疗器械消毒或灭菌前应尽量将附着的污物去净,并保持所要求的温度和湿度。
3、消毒或灭菌后的医疗器械,应以无菌水冲净残留甲醛才可使用。
4、甲醛气体对人有刺激性、毒性。使用时应注意个人防护,作业场所空气中高允许浓度为5mg/m3。
5、甲醛对金属有轻微腐蚀作用,消毒或灭菌应予注意,防止对物品的损害。
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答:可能的原因有:
1、IHC实验一抗和二抗不兼容;
2、没有足够的一抗与目的蛋白结合;
3、抗体可能不适用于IHC,因为其可能无法识别蛋白的天然(3D)形式;
4、一抗/二抗/信号放大试剂盒可能因储存不当、稀释不当或多次反复冻融而失去活性;
5、该蛋白不存在于目标组织中;
6、目的蛋白在组织中含量并不丰富;
7、二抗未避光保存(进行荧光检测时);
8、脱蜡可能不充分;
9、固定步骤可能会改变抗体识别的抗原表位;
10、抗体不能穿透蛋白所定位的细胞核(核蛋白);
11、PBS缓冲液被细菌污染,细菌会破坏目的蛋白上的磷酸基团(磷酸化蛋白);
12、抗原修复不全,对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位,以利于与抗体结合。
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