细胞发生凋亡时, 会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA,产生180bp-200bp的 DNA 片段,表现为琼脂糖凝胶电泳中呈现的特异的梯状Ladder图谱。基因组DNA双链或单链断裂时会出现产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的催化作用下,与SuperFlour-dUTP结合,从而通过荧光显微镜或流式细胞仪直接进行凋亡细胞的检测,这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(Terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。Tunel法可以对完整的单个凋亡细胞核或凋亡小体进行原位染色,能准确地反应细胞凋亡典型的生物化学和形态特征,可检测出极少量的凋亡细胞,因而在细胞凋亡的研究中广泛采用。
本试剂盒应用范围广,可用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。可选择性的检测凋亡细胞,而非坏死细胞或因辐照和药物治疗而造成的 DNA 链断裂的细胞。本试剂盒检测细胞凋亡,耗时短,只需一步染色反应,洗涤后即可检测。
PBS 缓冲液(pH~7.4);4%多聚甲醛;牛血清白蛋白 (BSA) 或正常的羊、牛血清;70%乙醇(自选);脱蜡溶剂(石蜡切片样本)
更新中...
答:细胞形态异常可能是由于支原体污染、有毒物质释放、营养不足等原因引起的。
解决方法有:
1、定期进行支原体检测,确保细胞无支原体污染;
2、检查培养基和血清的质量,避免使用过期或劣质的试剂;
3、观察细胞形态,发现异常及时采取措施,如更换培养基或使用相应的药物处理;
4、对于有毒物质释放引起的形态异常,可以尝试降低细胞密度或更换培养基。
Copyright ©湖北普美生物科技有限公司 All Rights Reserved. 工信部备案:鄂ICP备17001029号-1 技术支持:武汉微盟