Tris-Glycine vs Bis-Tris
预制胶，谁才是你的
WB实验救星?
还在为WB条带拖尾、微笑、分辨率低而抓狂？
面对众多预制胶，Tris-Glycine和Bis-Tris这两大“顶流”是否让你犯了选择困难症？
都说它们是拯救Western Blot的“神器”，但究竟谁才是你实验困境的救星？
别让选错胶毁了你的宝贵样本和宝贵时间！接下来将为你硬核拆解这对“胶圈双雄”的核心差异！
技术背景
在预制胶技术早期，Tris-Glycine体系是手工灌胶的“黄金标准”，其缓冲系统设计成熟，对大分子量蛋白的分离效果可靠，是实验室研究人员手工灌制凝胶的通用配方。但其致命短板是常温保质期不足一周，严重阻碍预制胶商业化。
直到2005年，Invitrogen以Bis-Tris体系破局，推出NuPAGE™预制胶，独特的缓冲系统赋予其超凡的稳定性，可以在4℃低温下保质期长达一年，并构筑核心专利壁垒，开创了预制胶市场。专利到期后，Bis-Tris技术迅速普及。由于其卓越的储存性、更快的电泳速度、更高的分辨率等优势，使其变为行业“必需品”，重塑预制胶格局，推动稳定高效即用型预制胶成为现代实验室标配。
核心差异
为什么选择Bis-Tris预制胶？
1
蛋白质更加稳定
强碱性环境增加了蛋白质发生不必要的化学修饰或降解的风险，特别是对于敏感的、不稳定的蛋白质或在电泳时间较长的情况下，而中性pH环境显著减少了对蛋白质完整性的损害。
2
条带更加锐利
Bis-Tris：中性pH下，SDS与蛋白质的结合更均一，迁移率与分子量对数的线性关系更好，尤其是在低分子量范围(<30 kDa)。这导致条带更窄、更锐利，相邻条带分离度更高，特别适合分离小蛋白或多肽。
Tris-Glycine：碱性pH下，SDS-蛋白复合物的电荷密度和迁移行为在高分子量和低分子量区域存在非线性，导致小分子量蛋白分辨率较差（容易压缩在一起），条带相对较宽。但在其适用的分子量范围(10-250 kDa)内，分辨率是标准可靠的。
3
样品处理更加温和
70度加热即可变性蛋白质，避免高温导致的Asp-Pro键断裂。
Asp-Pro键断裂的影响：
🔱Asp-Pro键常位于功能关键区域，断裂可能导致蛋白质失活。
🔱电泳时会出现额外截短条带，主条带消失或减弱，误认为是蛋白降解、表达失败、抗体失效。
🔱在质谱分析（蛋白质组学）中Asp-Pro键断裂导致肽段缺失，无法检测断裂区域序列。
🔱Asp-Pro键断裂改变抗原表位，抗体无法识别（假阴性诊断），疫苗/诊断试剂失效。
🔱断裂产物较难纯化，会导致目标蛋白得率下降。
4
电泳更加高效
Bis-Tris：MOPS/MES缓冲液允许在更高电压(如200V)下运行而不会产生过多的热量，因为它们的导电性较低。这使得电泳时间大大缩短，提高效率，并减少因产热导致的条带弯曲。
Tris-Glycine：在高电压下运行时更容易产热，可能导致凝胶温度升高，造成条带变形，通常需要在较低电压下运行更长时间。
5
选择更加灵活
使用传统配方的Tris-Glycine预制胶可分离10-250kDa的蛋白，Bis-Tris可兼容MOPS或MES电泳缓冲液，能实现更宽范围分子量蛋白的分离（10-300kDa），其中搭配MOPS电泳缓冲液能够更好的分离大分子蛋白（＞30kD），搭配MES电泳缓冲液能够更好的分离小分子蛋白（＜30kD）。
如何选择合适的预制胶？
1
选Bis-Tris预制胶
如果实验要求较高，需要高分辨率、蛋白高完整性或长期稳定保存，后续研究涉及质谱分析、功能研究等精细操作时，选择Bis-Tris体系更好，兼顾结果精度与样本可靠性。
2
选Tris-Glycine预制胶
若仅需基础分离，无需极高分辨率，实验室已有成熟的Tris- Glycine体系仍可胜任。
注意事项
//1.本预制胶不能置于 0℃以下冷冻，否则凝胶会冻裂。
//2.电泳缓冲液建议使用次数不超过3次，如长时间不用请冷藏保存。
//3.Tris-Glycine和Bis-Tris体系对样品的处理不同，Tris-Glycine通常使用Laemmli Buffer (含Tris-HCl, pH6.8，95℃煮沸)，Bis-Tris通常使用LDS Buffer (含Bis-Tris, pH8.4，70℃加热)。
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